大腦及全身炎癥在Presenilin-1-Presenilin-2雙基因敲除小鼠中的活化.pdf

1、老年癡呆癥(Alzheimer's disease,AD)是一類多發(fā)性神經(jīng)退行性疾病,其特征性病理變化為大腦皮層萎縮,并伴有β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,β-AP)沉積,神經(jīng)原纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangles,NFT)以及神經(jīng)元數(shù)目的減少。早老素基因(Presenilin,PS)在AD病理學(xué)中起重要作用。條件性presenilin-1和presenilin-2雙敲除(PS conditional doubl

2、e knock out,dKO)小鼠呈現(xiàn)出很多類似AD的癥狀,包括認(rèn)知能力衰退和前腦退化等,但是這些病理癥狀并不依賴于腦內(nèi)Aβ的沉積,確切的分子機(jī)制有待闡明。但是,最近對(duì)病人的檢查以及在動(dòng)物模型上的研究表明,神經(jīng)退行性大腦內(nèi)存在炎癥反應(yīng),而后者極有可能是導(dǎo)致神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的因素之一。
　　1.大腦炎癥反應(yīng)在Presenilin-1/Presenilin-2雙基因敲除小鼠中的激活本研究系統(tǒng)地研究了3月齡,6月齡,9月齡和12月齡

3、dKO小鼠大腦炎癥的活化狀況,定量PCR和western blot法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)從3月齡起,dKO小鼠大腦皮層和海馬部位的膠質(zhì)細(xì)胞(包括小膠質(zhì)和星形膠質(zhì)細(xì)胞)呈現(xiàn)明顯的活化狀態(tài)。用定量PCR和ELISA法檢測(cè)補(bǔ)體經(jīng)典活化途徑上游因子C1qα和C4的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)mRNA和蛋白水平也都顯著升高。另外,利用蛋白芯片對(duì)9月齡小鼠大腦皮層中差異表達(dá)的炎癥因子進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)有一些炎癥因子表達(dá)顯著升高。ELISA法對(duì)關(guān)鍵因子IL-1β進(jìn)行了驗(yàn)證。以上結(jié)

4、果表明dKO小鼠大腦從3月齡起就已經(jīng)表現(xiàn)出明顯的炎癥活化,推測(cè)膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞異?；罨?異常分泌表達(dá)炎癥因子,炎癥被級(jí)聯(lián)擴(kuò)大并參與dKO小鼠神經(jīng)退行性癥狀的發(fā)生過程。
　　2.全身炎癥反應(yīng)在Presenilin-1/Presenilin-2雙基因敲除小鼠中的激活本研究同時(shí)系統(tǒng)地考察了早老素基因雙敲除小鼠神經(jīng)退行性病變中系統(tǒng)性炎癥的活化狀況。用白細(xì)胞計(jì)數(shù)法對(duì)3,6,9,12月齡dKO和同窩對(duì)照組小鼠血液中白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果發(fā)

5、現(xiàn),從6月齡起,dKO的白細(xì)胞數(shù)均顯著高于對(duì)照小鼠,在3月齡時(shí)未有顯著性差異。生化分析法檢測(cè)了dKO小鼠血漿中高密度脂蛋白的水平,并發(fā)現(xiàn)在6月齡和12月齡時(shí),dKO小鼠中的高密度脂蛋白均顯著低于對(duì)照組小鼠。利用蛋白芯片對(duì)9月齡小鼠血清中差異表達(dá)的炎癥因子進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)有14種炎癥因子表達(dá)顯著升高,另外,有4個(gè)炎癥因子表達(dá)顯著性降低。ELISA法對(duì)關(guān)鍵因子IL-1β進(jìn)行了驗(yàn)證。以上結(jié)果表明dKO小鼠6月齡起開始表現(xiàn)出明顯的系統(tǒng)性炎癥,并且