阿托伐他汀對Aβ小鼠認知障礙的作用及其機制研究.pdf

1、隨著人口老齡化的出現(xiàn)，阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，預測到2050年將超過9000萬。由于缺乏有效的預防、診斷和治療措施，AD已成為死亡病因的第四位。他汀類藥是膽固醇合成中限速酶3-羥基-3-甲基戊二酰CoA(HMG-CoA)還原酶的競爭性抑制劑，作為降膽固醇藥已廣泛應用于防治動脈粥樣硬化。流行病學資料顯示，他汀類藥能降低AD的發(fā)病風險，特別在有腦血管疾病的患者。臨床資料表明，阿托伐

2、他?。ˋtorvastatin, ATV）能改善輕中度AD患者的認知障礙，延緩AD的病程進展，但其確切的分子機制仍然不清楚。β-淀粉樣蛋白(Amyloid-beta, Aβ)是附著在小膠質(zhì)細胞的必需結(jié)構(gòu)域，觸發(fā)胞漿IkBα降解和NF-κB p65核內(nèi)移，啟動促炎癥因子、趨化因子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控和釋放，誘發(fā)神經(jīng)炎性反應。小膠質(zhì)細胞釋放神經(jīng)炎性因子能損害神經(jīng)系統(tǒng)的功能和導致神經(jīng)元的退行性變性。有研究報道，他汀類藥物通過激活PI3K-Akt信號通路

3、能抑制Aβ誘導氧化應激和腦的炎癥反應，減少Aβ的神經(jīng)毒作用。
　　目的：⑴確定ATV是否能改善Aβ25-35小鼠的認知功能障礙；⑵通過觀察ATV對Aβ25-35小鼠海馬炎癥反應的作用，以闡明ATV抗癡呆治療作用的機制。
　　方法：①Aβ25-35小鼠模型制備:將Aβ25-35進行小鼠的側(cè)腦室注射，制作AD小鼠模型。以相同體積的生理鹽水進行側(cè)腦室注射作為對照。于Aβ25-35注射后4小時開始給予阿托伐他汀灌胃，每天一次。②行為

4、學檢查:Morris水迷宮檢測與海馬相關(guān)的空間認知功能;Y迷宮檢測短時空間記憶能力。③海馬的電生理學檢測:制備小鼠海馬腦切片。電刺激Schaffer纖維，記錄CA1區(qū)興奮性突觸后電位(EPSP)的斜率和誘導長時程增強(LTP)。④免疫細胞染色:進行海馬CA1區(qū)星型膠質(zhì)細胞（GFAP）和小膠質(zhì)細胞(Iba1)檢測和計數(shù)。⑤用Western blot、RT-PCR分析:檢測炎性因子IL-1β、TNF-α表達和水平。
　　結(jié)果：⑴與對照

5、組小鼠相比，Aβ25-35小鼠在水迷宮的登臺潛伏期明顯延長，軌跡實驗的站臺象限的游泳時間減少，Y迷宮中自發(fā)交替行為即短時空間記憶能力降低----Aβ25-35小鼠的空間認知功能降低。⑵ATV（10mg/kg/天）灌胃10天治療可以減少Aβ25-35小鼠登臺潛伏期，增加Aβ25-35小鼠在站臺象限的游泳時間和提高Y迷宮中自發(fā)交替行為----ATV具有抗癡呆作用。⑶與對照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠Schaffer-CA1突觸的EPSP斜

6、率明顯降低，長時程增強（LTP）不能誘導——Aβ25-35損害突觸功能和突觸可塑性。⑷ATV治療能增加Aβ25-35小鼠Schaffer-CA1突觸的EPSP斜率和恢復LTP的誘導----ATV能拮抗Aβ25-35的神經(jīng)損害作用。⑸與對照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠海馬CA1區(qū)Iba-1陽性細胞數(shù)明顯增加，IL-1β mRNA水平及IL-1β蛋白水平增加，TNF-α mRNA和TNF-α蛋白表達水平也都明顯增加----Aβ25-35誘

7、導神經(jīng)炎性反應。⑹ATV治療可明顯減少Aβ25-35小鼠海馬的Iba-1陽性細胞數(shù)，降低IL-1β和TNF-α的水平----ATV能減弱Aβ25-35誘導神經(jīng)炎性反應。⑺在Aβ25-35小鼠，用FOH以補充異戊二烯中間體可以阻斷ATV的抗癡呆作用，ATV的抗炎性作用和神經(jīng)保護作用----ATV通過降低異戊二烯中間體發(fā)揮抗癡呆作用。⑻與對照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠海馬CA1區(qū)Akt磷酸化水平明顯降低，而ATV治療能增加Aβ25-35