骨保護(hù)素對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥免疫反應(yīng)的影響.pdf

1、觀察骨保護(hù)素(osteoprotegerin，OPG)對(duì)樹突狀細(xì)胞存活力及其生成炎癥介質(zhì)IL-12的影響，探討OPG對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥免疫反應(yīng)的影響。 [方法]：取健康志愿者外周血分離出單個(gè)核細(xì)胞，采用貼壁培養(yǎng)法得到單核細(xì)胞，經(jīng)三種細(xì)胞因子——重組人粒一巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM—CSF)、重組人白細(xì)胞介素4(IL-4)和重組人腫瘤壞死因子(rhTNF—α)聯(lián)合誘導(dǎo)培養(yǎng)，9-ll天后收獲得到純度較高的成熟樹突狀細(xì)胞。收獲的

2、樹突狀細(xì)胞按1×10<'5>／well接種，分為空白對(duì)照組；細(xì)胞核因子κβ受體活化因子配體RANKL組(1.0μg／m1)：RANKL+OPG組(均為1.0μg／m1)培養(yǎng)觀察4天，臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞。同時(shí)將樹突狀細(xì)胞按4×10<,5>／well接種，分5組培養(yǎng)：1．對(duì)照組2．RANKL組(1.0μg／m1)3-5.RANKL+OPG組：OPG濃度分別為O.5，1．0，2.O μg／m1。培養(yǎng)12小時(shí)后ELISA定量檢測(cè)細(xì)胞上清液中I

3、L-12的表達(dá)。 [結(jié)果]：與空白對(duì)照組相比，RANKL組活細(xì)胞數(shù)增多，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，培養(yǎng)第一、二天RANKL組和RANKL+OPG組存活細(xì)胞數(shù)差別不大，第三天開(kāi)始RANKL+OPG組活細(xì)胞數(shù)少于RANKL組(day3,2.53±0.58 VS 5.3±0.71×10<'4>個(gè)，P<0.05：day4,2.05±0.48 VS 4.6±0.46×10<'4>個(gè)，P<0.05)。與RANKL組相比隨著OPG組OPG劑量的增加