燈盞花素對(duì)腦復(fù)蘇后Caspase-12及iNOS表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討燈盞花素（Breviscapine，Br）對(duì)Sprague-Dawley（SD）大鼠全腦缺血/再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）損傷后大腦海馬CA1區(qū)Caspase-12及iNOS表達(dá)的影響，進(jìn)一步闡明其在腦復(fù)蘇中的作用機(jī)制。方法：將90只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)（SO）組30只：全腦缺血/再灌注（I/R）組30只；燈盞花素（Br）組30只：每組按其再灌注的時(shí)間又分為2、6、12、24、48小時(shí)（h）共5

2、個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)，采用簡(jiǎn)化的Pulsinelli等的四血管阻塞法建立大鼠腦I/R損傷的模型。假手術(shù)組與腦I/R組于再灌注后每6h腹腔注射0.9％的生理鹽水1ml/kg，Br組則于再灌注后每6h腹腔注射Br2.5mg/kg，然后在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦。用免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞中Caspase-12及iNOS的表達(dá)，用原位雜交法檢測(cè)海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞中Caspase-12mRNA的表達(dá)，測(cè)量其平均光密度值，用蘇木精-伊紅

3、（HE）染色檢測(cè)存活錐體細(xì)胞數(shù)，用TUNEL原位術(shù)端標(biāo)記法檢測(cè)凋亡錐體細(xì)胞數(shù)。結(jié)果：在SO組，Caspase-12蛋白及mRNA、iNOS表達(dá)的平均光密度值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，存活神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)及凋亡細(xì)胞數(shù)均無明顯變化，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。在I/R組，可見Caspase-12蛋白及mRNA平均光密度值在12小時(shí)升高，在24小時(shí)達(dá)高峰，后逐漸下降；iNOS蛋白在12小時(shí)平均光密度值開始升高，24小時(shí)達(dá)到高峰，到48小時(shí)開始下降；存活

4、神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)而減少（p均<0.01）；凋亡細(xì)胞數(shù)則隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加（p均<0.01）。在Br組，Caspase-12蛋白及Caspase-12mRNA平均光密度值6小時(shí)達(dá)到高峰，于12小時(shí)開始下降，在48小時(shí)達(dá)最低值；iNOS蛋白平均光密度值在6小時(shí)開始升高，在12小時(shí)達(dá)高峰，在24小時(shí)開始降低；存活神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸減少，于12小時(shí)達(dá)最低值，此后細(xì)胞數(shù)目逐漸增多，并于48小時(shí)存活細(xì)胞數(shù)目達(dá)最