基于CTL表位的宮頸癌治療性多肽疫苗的分子設(shè)計(jì)、合成及免疫學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、 子宮頸癌是婦女最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，人乳頭瘤病毒(HPV)早期基因E7的表達(dá)在宮頸癌細(xì)胞癌變進(jìn)程和維持癌細(xì)胞惡性表型方面起著重要作用。而且，正常組織中不存在這種蛋白。因此，本研究以HPV E7作為靶標(biāo)，設(shè)計(jì)并合成宮頸癌治療性疫苗。 業(yè)已證明，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)介導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫在機(jī)體控制腫瘤中起重要作用。 本研究根據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)理論及分子設(shè)計(jì)技術(shù)，設(shè)計(jì)宮頸癌治療性多肽，以芴甲氧羰基固相法合成多肽，用高效

2、液相色譜分析多肽的純度，對(duì)所合成的多肽采用電噴霧質(zhì)譜進(jìn)行定性鑒定，以不同多肽體外誘導(dǎo)的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)為效應(yīng)細(xì)胞，以負(fù)載表位肽T2細(xì)胞為靶細(xì)胞，用標(biāo)準(zhǔn)51Cr釋放試驗(yàn)檢測(cè)各肽在HLA-A2.1陽(yáng)性健康者PBMC中誘導(dǎo)的表位特異性CTL活性。此外，我們還觀察了CTL對(duì)宮頸癌細(xì)胞株Caski的殺傷作用，用標(biāo)準(zhǔn)51Cr釋放試驗(yàn)檢測(cè)各肽在HLA-A2.1/Kb轉(zhuǎn)基因鼠中誘導(dǎo)的表位特異性CTL活性， 此外，我們以T2細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)