燈盞細(xì)辛注射液藥物相互作用研究.pdf

1、燈盞細(xì)辛注射液為中藥制劑，由菊科植物短葶飛蓬[Erigeron breviscapus（Vant.）Hand-Mazz]的干燥全草經(jīng)提取制成的中藥注射液，其主要化學(xué)成分為野黃芩苷和總咖啡酸酯，具有活血祛瘀、通絡(luò)止痛的功效。在治療冠心病心絞痛、中風(fēng)后遺癥如腦梗塞等疾病方面取得了較好的療效。 由于其在臨床上應(yīng)用廣泛，人們?cè)谑褂脽舯K細(xì)辛注射液的同時(shí)很有可能使用或者服用其它藥物，多藥合用易導(dǎo)致藥物相互作用，引發(fā)不良反應(yīng)。因此了解燈盞細(xì)辛

2、注射液對(duì)細(xì)胞色素P450的影響及預(yù)測(cè)藥物可能存在的相互作用，對(duì)臨床用藥的安全性具有重要意義。本文試圖通過(guò)燈盞細(xì)辛注射液對(duì)細(xì)胞色素P450的影響和藥物相互作用研究，來(lái)探討燈盞細(xì)辛注射液與其他中西藥物合用時(shí)的安全性與合理性。 1.燈盞細(xì)辛注射液對(duì)小鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450含量的影響 目的：研究燈盞細(xì)辛注射液對(duì)小鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450含量的影響。 方法：將昆明種小鼠分為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（苯巴比妥鈉80mg·

3、kg-1，ip，共7d）、燈盞細(xì)辛注射液正常劑量組、高劑量組（10、30mg·kg-1，ip，共14d）。采用聚乙二醇沉淀法制備小鼠肝微粒體；考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白濃度；分光光度法檢測(cè)肝微粒體細(xì)胞色素P450酶含量及活性；單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果：肝重指數(shù)苯巴比妥組與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），兩劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其他各組之間差異無(wú)顯著性（P>0.05）；小鼠肝微粒體蛋白含量，兩

4、劑量組之間差異無(wú)顯著性（P>0.05），其他各組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，P<0.01）；小鼠細(xì)胞色素P450含量，兩劑量組之間差異無(wú)顯著性（P>0.05），其他各組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，P<0.01）；對(duì)紅霉素-N-脫甲基酶（ERD）的影響：苯巴比妥組、兩劑量組與正常對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其他組之間差異無(wú)顯著性（P>0.05）；對(duì)氨基比林-N-脫甲基酶（AMD）的影響：苯巴比妥組與空

5、白對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其他組之間差異無(wú)顯著性（P>0.05）。 結(jié)論：燈盞細(xì)辛注射液對(duì)小鼠肝微粒體蛋白、細(xì)胞色素P450含量有影響，對(duì)CYP3A可能有抑制作用，對(duì)氨基比林-N-脫甲基酶活性基本無(wú)影響。 2.“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu(píng)價(jià)燈盞細(xì)辛注射液對(duì)大鼠細(xì)胞色素P450酶亞型的影響 目的：研究燈盞細(xì)辛注射液對(duì)大鼠肝細(xì)胞色素氧化酶P450亞型CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的

6、誘導(dǎo)或抑制作用。 方法：本文采用“Cocktail”探針?biāo)幬锓ǎ瑴y(cè)定兩個(gè)劑量組多次給予燈盞細(xì)辛注射液前后大鼠血漿當(dāng)中相應(yīng)的3個(gè)探針?biāo)幬锊鑹A、氨苯砜和氯唑沙宗的濃度及其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。通過(guò)藥物代謝的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的變化評(píng)價(jià)肝細(xì)胞色素氧化酶P450亞型CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的誘導(dǎo)或抑制作用。HPLC測(cè)定條件考察結(jié)果表明，可同時(shí)測(cè)定三種探針?biāo)幬锏臐舛葟亩u(píng)價(jià)燈盞細(xì)辛注射液對(duì)大鼠肝細(xì)胞色素氧化酶P450亞型的影響：雄性大鼠

7、隨機(jī)分為兩組。探針?biāo)幬餅閱蝿┝拷o藥，給藥途徑為灌胃；燈盞細(xì)辛注射液為多劑量給藥，給藥途徑為腹腔注射。實(shí)驗(yàn)第1天，大鼠在禁食12h后于次日清晨灌胃給予探針?biāo)幬锊鑹A30 mg·kg-1、氯唑沙宗50 mg·kg-1、氨苯砜20 mg·kg-1。分別于探針?biāo)幗o藥前和給藥后9、15、30min和1、1.5、2、2.5、4、6、8、10、13、24h于大鼠眼球靜脈叢取血，置于0.5 ml肝素化塑料離心管中，4000rpm離心10min，上清血漿-

8、20℃保存至分析。第2天腹腔注射燈盞細(xì)辛注射液，正常劑量為7 mg·kg-1，高劑量為21 mg·kg-1，連續(xù)14天。實(shí)驗(yàn)第16天清晨，于禁食12h后灌胃給予探針?biāo)幬锊鑹A、氯唑沙宗和氨苯砜，各藥物劑量和采血時(shí)間、過(guò)程均與第1天相同。大鼠血藥濃度-時(shí)間曲線數(shù)據(jù)經(jīng)DAS軟件計(jì)算，通過(guò)給藥前和給藥后的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的比較，間接反映燈盞細(xì)辛注射液對(duì)大鼠肝細(xì)胞色素氧化酶P450亞型CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影響。 結(jié)果：

9、燈盞細(xì)辛注射液正常劑量組探針?biāo)幬锝o藥前和給藥后茶堿t1/2β分別為2.04、3.0h，AUC0-13h分別為112.17、132.4μg·h/L；氨苯砜t1/2β分別為7.11、10.69h，AUC0-24h分別為85.85、84.17μg· h/L；氯唑沙宗t1/2β分別為1.71、1.30h，AUC0-6h分別為31.18、56.80μg·h/L。經(jīng)t檢驗(yàn)，表明在連續(xù)注射14天燈盞細(xì)辛注射液正常劑量后，探針?biāo)幬锏乃巹?dòng)學(xué)參數(shù)與給藥前比

10、較，t1/2β：茶堿和氨苯砜差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；AUC0-t：氯唑沙宗差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），給藥前為給藥后的1.82倍；清除率（CL）：氯唑沙宗有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。燈盞細(xì)辛注射液高劑量組探針?biāo)幬锝o藥前和給藥后茶堿t1/2β分別為1.61、2.39h，AUC分別為119.92、132.35μg·h/L；氨苯砜t1/2β分別為6.90、10.78h，AUC分別為

11、65.91、99.35μg·h/L；氯唑沙宗t1/2β分別為1.85、0.93h，AUC分別為36.42、46.42μg·h/L。經(jīng)t檢驗(yàn)，表明在連續(xù)注射14天燈盞細(xì)辛注射液高劑量后，探針?biāo)幬锏乃巹?dòng)學(xué)參數(shù)與給藥前比較，t1/2β：茶堿和氨苯砜差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；AUC0-t：氨苯砜差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），給藥前為給藥后的1.51倍，氯唑沙宗差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），給藥前為給藥后的1.27倍；清除率（CL

12、）：氯唑沙宗有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Cmax：茶堿差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論：連續(xù)注射14d燈盞細(xì)辛注射液，與用藥前比較，正常劑量對(duì)大鼠肝細(xì)胞色P450酶亞型CYP1A2和CYP3A4活性基本無(wú)影響，對(duì)CYP2E1有輕微抑制作用；高劑量對(duì)大鼠肝細(xì)胞色素P450酶亞型CYP2E1和CYP3A4有輕微抑制作用，對(duì)CYP1A2活性影響不顯著。 3.燈盞細(xì)辛注射液對(duì)

13、鹽酸丁咯地爾大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響 目的：研究燈盞細(xì)辛注射液對(duì)鹽酸丁咯地爾在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響，為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。 方法：15只大鼠按體重隨機(jī)分為3組，每組3只，分別為鹽酸丁咯地爾（70mg/kg）單獨(dú)給藥組、燈盞細(xì)辛注射液正常劑量（6.5 mg/kg）+鹽酸丁咯地爾合并給藥組、燈盞細(xì)辛注射液高劑量（19.5 mg/kg）+鹽酸丁咯地爾合并給藥組。合并給藥組大鼠連續(xù)10天腹腔注射燈盞細(xì)辛注射液，每日1次，自由飲

14、食、飲水。第11天，于給藥前禁食12h，先腹腔注射燈盞細(xì)辛注射液，30min后ig鹽酸丁咯地爾70 mg/kg；鹽酸丁咯地爾單獨(dú)給藥組大鼠腹腔注射相同劑量生理鹽水，每日1次。第11天，于給藥前禁食12h，自由飲水，ig鹽酸丁咯地爾70 mg/kg。反相HPLC-UV法測(cè)定鹽酸丁咯地爾血漿濃度，比較三組大鼠的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。色譜條件：色譜柱：ZORBAX SB-C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；柱溫：30℃；流速：1.0 mL·

15、min-1；進(jìn)樣量：25μL；流動(dòng)相：甲醇-5mmol·L-1乙酸銨緩沖液（含0.5％冰醋酸，pH值為3.50）；紫外檢測(cè)（λ=282 nm）；以氯霉素為內(nèi)標(biāo)測(cè)定丁咯地爾的含量。 結(jié)果：鹽酸丁咯地爾單獨(dú)給藥組的丁咯地爾AUC0-8為（6.396±2.19）μg·mL-1·h，t1/2β為（0.816±0.06）h；鹽酸丁咯地爾+燈盞細(xì)辛注射液正常劑量（6.5 mg/kg）合并給藥組的丁咯地爾AUC0-8為（7.732±2.66）