脈絡(luò)寧注射液的代謝性藥物相互作用研究.pdf

1、本研究分為四部分： 一、脈絡(luò)寧注射液對(duì)小鼠CYP2E1和CYP3A活性影響的研究 目的：研究脈絡(luò)寧注射液對(duì)小鼠CYP450總活性及CYP2E1和CYP3A活性的影響。 方法：采用紫外分光光度法，分別在595nm測(cè)定微粒體蛋白含量、450nm測(cè)定CYP450含量以及412nm測(cè)定甲醛含量，并用單因素方差分析比較給藥組（正常劑量組和高劑量組）與對(duì)照組（生理鹽水組和苯巴比妥組）小鼠在肝臟系數(shù)、肝微粒體蛋白含量、CYP4

2、50含量及甲醛生成速率等方面存在的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)果：兩種劑量脈絡(luò)寧對(duì)小鼠肝臟系數(shù)和CYP450含量影響都不顯著（P>0.05），但均能提高肝微粒體蛋白含量；兩劑量脈絡(luò)寧均可減少氨基比林的甲醛生成率；正常劑量處理后紅霉素的甲醛生成率變化不明顯（P>0.05），高劑量處理后生成率減少。 結(jié)論：兩種劑量脈絡(luò)寧均可抑制CYP2E1的活性，正常劑量對(duì)CYP3A活性影響不顯著，高劑量則可抑制CYP3A活性。 二、茶堿、氯唑

3、沙宗和氨苯砜在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)相互作用研究 目的：研究茶堿、氯唑沙宗和氨苯砜在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)相互作用，評(píng)價(jià)3者作為Cocktail探針的可行性。 方法：首先建立以二氯甲烷為液-液萃取溶劑，以高效液相色譜-紫外檢測(cè)法為檢測(cè)手段的大鼠血漿中茶堿、氯唑沙宗和氨苯砜同時(shí)測(cè)定的樣品分析方法。21只大鼠，隨機(jī)分成3組（n=7），即茶堿組、氯唑沙宗組和氨苯砜組，每組大鼠均進(jìn)行前后2輪藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)。在第1輪試驗(yàn)中，3組大鼠分別單獨(dú)灌胃給

4、予茶堿（30mg·kg-1）、氯唑沙宗（50mg·kg-1）和氨苯砜（20mg·kg-1），按照各自的采血時(shí)程進(jìn)行采血試驗(yàn)；經(jīng)過14天的清洗期和恢復(fù)期后，采用相同的給藥劑量，3組大鼠均同時(shí)灌胃給予3個(gè)探針?biāo)幬?，重?fù)第1輪的采血試驗(yàn)。用所建立的分析方法測(cè)定大鼠體內(nèi)探針的血藥濃度，DAS1.0軟件擬合計(jì)算t1/2、AUC、CL/F和Cmax等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行同一組大鼠前后2輪試驗(yàn)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的統(tǒng)計(jì)分析比較，以判斷3者合用時(shí)是否發(fā)

5、生藥動(dòng)學(xué)上的相互干擾。 結(jié)果：大鼠單獨(dú)和同時(shí)給予茶堿、氯唑沙宗和氨苯砜后，各探針的t1/2、AUC、CL/F和Cmax等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均無顯著性差異（P>0.05）。 結(jié)論：茶堿、氨苯砜和氯唑沙宗在同時(shí)給藥時(shí)，彼此之間不會(huì)發(fā)生藥動(dòng)學(xué)上的相互干擾，可作為Cocktail探針用于同時(shí)評(píng)價(jià)藥物對(duì)CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影響。 三、脈絡(luò)寧注射液對(duì)大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性

6、影響的研究 目的：研究脈絡(luò)寧注射液對(duì)大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影響。 方法：14只大鼠，隨機(jī)分成正常劑量組和高劑量組，每組7只，均進(jìn)行前后2輪藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)。在第1輪試驗(yàn)中，2組大鼠均同時(shí)灌胃給予3個(gè)探針?biāo)幬铮ú鑹A，30 mg·kg-1；氯唑沙宗，50mg·kg-1和氨苯砜，20mg·kg-1），在24h內(nèi)進(jìn)行采血試驗(yàn)；次日開始，按照臨床用藥劑量，連續(xù)14天靜脈給予脈絡(luò)寧注射液（正常劑量組，2mL·k

7、g-1；高劑量組，4mL·kg-1），第16天重復(fù)第1輪采血試驗(yàn)。用建好的茶堿、氯唑沙宗和氨苯砜同時(shí)測(cè)定的血樣分析方法，測(cè)定大鼠體內(nèi)各探針的血藥濃度，DAS2.0軟件擬合計(jì)算t1/2.AUC、CL/F和Cmax等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行同一組大鼠前后2輪試驗(yàn)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的統(tǒng)計(jì)分析比較，以判斷經(jīng)2種劑量脈絡(luò)寧注射液處理前后，大鼠體內(nèi)3個(gè)探針的藥動(dòng)學(xué)過程是否存在差異。 結(jié)果：在1個(gè)給藥療程（14天）內(nèi)，大鼠給予正常劑量脈絡(luò)寧注射

8、液后，3個(gè)探針的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均無顯著性變化（P>0.05）；給予高劑量脈絡(luò)寧注射液后，與用藥前相比，茶堿的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)沒有顯著變化（P>0.05）；而氨苯砜和氯唑沙宗的AUC0-24h均有升高趨勢(shì)（P<0.05），給藥后分別是給藥前的1.44倍和1，28倍，同時(shí)氯唑沙宗的CL/F顯著降低（P<0.05）。 結(jié)論：正常劑量脈絡(luò)寧對(duì)大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性均無影響，而高劑量脈絡(luò)寧對(duì)大鼠CYP2E1和CYP3A4均

9、有弱抑制作用，但不影響CYP1A2活性。 四、脈絡(luò)寧注射液合并使用阿司匹林對(duì)大鼠體內(nèi)水楊酸藥動(dòng)學(xué)影響的研究 目的：研究脈絡(luò)寧注射液合并阿司匹林單劑量和多劑量用藥后，大鼠體內(nèi)水楊酸藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的變化情況。 方法：首先建立以乙腈沉淀血漿蛋白，以高效液相色譜-紫外檢測(cè)法為檢測(cè)手段的大鼠血漿中水楊酸的樣品分析方法。16只大鼠，隨機(jī)分為阿司匹林組（n=8）和合并用藥組（n＝8）；2組大鼠均參照臨床等效用量（阿司匹林，7.5m

10、g·kg-1；脈絡(luò)寧注射液，3mL·kg-1），每天單獨(dú)給予阿司匹林（阿司匹林組）或同時(shí)給予阿司匹林和脈絡(luò)寧注射液（合并用藥組），連續(xù)8天，并分別在給藥后的第1天和第8天于14h內(nèi)進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)采血試驗(yàn)。用所建立的水楊酸血樣分析方法，測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)大鼠體內(nèi)水楊酸的血藥濃度，DAS1.0軟件擬合藥時(shí)曲線并計(jì)算t1/2、AUC、CL/F和Cmax等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，同時(shí)采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較單劑量和多劑量合并用藥后，同單獨(dú)使用阿司匹林相比，大鼠體內(nèi)水楊

11、酸的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異。 結(jié)果：?jiǎn)蝿┝拷o藥后，相比于阿司匹林組，合并用藥組大鼠體內(nèi)水楊酸的t1/2、AUC0-14h和AUC0-∞顯著減小，CL/F顯著增大，Cmax變化不明顯；而多劑量合并用藥后，兩組大鼠體內(nèi)水楊酸的t1/2、AUC0-14h、AUC0-∞、CL/F和Cmax等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均無顯著性差異（P>0.05）。 結(jié)論：?jiǎn)蝿┝亢喜⒂盟幒螅}絡(luò)寧注射液可加快阿司匹林在體內(nèi)的清除；而多劑量合并用藥后，脈