金緣連翹的變異來(lái)源、組織培養(yǎng)技術(shù)及其越冬性的研究.pdf

1、本文通過(guò)應(yīng)用PCR-RFLP分析、組織培養(yǎng)、物候觀測(cè)、生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)查和生理指標(biāo)測(cè)定等方法和手段，對(duì)東北連翹、金鐘連翹和金緣連翹進(jìn)行了定性和定量的比較分析，旨在探索金緣連翹的變異來(lái)源、組培快繁和越冬性，為金緣連翹的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。 應(yīng)用PCR-RFLP技術(shù)對(duì)東北連翹、金鐘連翹和金緣連翹三種材料的細(xì)胞核基因組DNA進(jìn)行遺傳變異分析。通用引物擴(kuò)增出片段，然后用10種限制性內(nèi)切酶對(duì)其進(jìn)行酶切，共檢測(cè)到240條DNA片段，其中210條

2、具有多態(tài)性，占87.5％。所有的90種引物/酶組合中，得到清晰穩(wěn)定的50種引物/酶組合，其中在14份材料中有32種引物/酶組合(占60.4％)能檢測(cè)到多態(tài)性。結(jié)果表明：金緣連翹、金鐘連翹和東北連翹細(xì)胞核基因組間存在明顯遺傳相似性和差異性；金緣連翹與金鐘連翹有較近的親緣關(guān)系，金緣連翹與東北連翹表現(xiàn)出較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系，表明金緣連翹是金鐘連翹的變異。 以金緣連翹莖段為外植體，探索金緣連翹組織培養(yǎng)快速繁殖各階段的最佳培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)程序。

3、結(jié)果表明：金緣連翹初代培養(yǎng)途徑最適培養(yǎng)基配方為MS+BA3.0 mg·L<'-1>+NAA0.08mg·L<'-1>+IBA0.08mg·L<'-1>．幼苗生長(zhǎng)快；愈傷組織途徑增殖最佳培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg·L<'-1>+NAA0.08mg·L<'-1>+IBA0.08w mg·L<'-1>較好；生根階段的最適培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg·L<'-1>+NAA0.04mg·L<'-1>+IBA0.04mg·L<'-1>，生根率可達(dá)

4、80％以上，根系粗壯，生長(zhǎng)迅速。 通過(guò)低溫脅迫處理，金緣連翹與東北連翹、金鐘連翹的幼苗的生理生化指標(biāo)都有較大的變化，而且因種類(lèi)的不同，而呈現(xiàn)不同的幅度變化。脯氨酸含量、可溶性糖含量、丙二醛含量隨低溫處理時(shí)間的增加而增大。這三種連翹葉片中的脯氨酸含量都表現(xiàn)為增加，但有些在低溫脅迫一段時(shí)間后，脯氨酸含量達(dá)到最高點(diǎn)，然后隨脅迫時(shí)間增加而降低。依據(jù)葉片在低溫脅迫條件下的生理生化指標(biāo)的變化將三種連翹抗寒性按由大到小的排序排列為：東北連翹≥