懷山藥的組織培養(yǎng)及其相關(guān)研究.pdf

1、本文第一章利用正交設(shè)計L<,9>(3<'4>)考察3種外源激素(IBA、NAA、6-BA)對懷山藥(Dioscorea opposite Thunb)不帶腋芽的節(jié)段的分化培養(yǎng)和植株再生的影響。IBA、NAA、6-BA的3個水平分別是0、0.4、0.8(mg/L，以下單位相同)，0.25、0.5、1.0，0.5、1.5、2.0。九個激素組合分別是：(1)2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(2)2.

2、0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA，(3)2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(4)1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA，(5)1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA+0 mg/LIBA， (6)1.5 mg/L 6-BA+0.25mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(7)0.5 mg/L 6-BA+1.0 m

3、g/LNAA+0mg/LIBA，(8)0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(9)0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA.通過本試驗(yàn)得到適合懷山藥不帶腋芽的節(jié)段分化培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基：改良MS+100g/L香蕉+0.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖。壯苗培養(yǎng)基為：改良MS+100g/L香蕉+0.5mg/LNAA+O.

4、5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖。在轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基20天～30天，無菌苗形成圓形微型塊莖(Microtuberization)，60天時形成率為100％，直徑約為5mm～12mm，形成數(shù)量較多(一株可形成1～3個，且形成一個的較少)。在本文中，首次對無菌苗的葉柄。、莖段和根塊在6-BA、NAA、IBA的不同濃度組合下直接分化成苗進(jìn)行了探討，選出的最適合這三種外植體直接分化成苗途徑的激素組合分別是：最適無菌根塊分化培養(yǎng)基是，改良的M

5、S+100g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.4mg/L IBA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖；最適無菌莖段分化的培養(yǎng)基是，改良MS+100g/L香蕉+0.5 mg/L6-BA+0.5mg/L NAA+0.8mg/L IBA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖；最適無菌葉柄分化的培養(yǎng)基是，改良MS+100g/L香蕉+1.5/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.5％瓊脂+0.5％

6、活性炭+3％蔗糖。通過試驗(yàn)首次實(shí)現(xiàn)葉柄和根塊直接分化成苗，并且使莖段和根塊的分化率達(dá)到了100％，并證明，無菌根塊是研究懷山藥直接分化成苗的一個良好的培養(yǎng)系統(tǒng)。 在本文的第三章采用火焰原子吸收法測定了山藥組培微塊莖和培養(yǎng)前后培養(yǎng)基中的K、Cu、 Fe、Mn、Zn五種金屬元素的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，除Cu外，其余四種元素的含量均高于相關(guān)報道文獻(xiàn)數(shù)倍甚至數(shù)十倍(已有文獻(xiàn)報道的山藥成品中的鉀2563～7147mg/L、鋅2.4～7.2

7、mg/L、鐵5.7～24 mg/L、錳0.3～3.8 mg/L、銅0.9～3.2 mg/L，而本試驗(yàn)測得的各金屬元素的含量是鉀132182.27 mg/L，鐵126.43 mg/L，銅1.23 mg/L，鋅31.06 mg/L，錳69.51 mg/L)，這也說明在組培條件下形成的微型塊莖對金屬元素的富積能力高于在自然生長條件下。培養(yǎng)基在培養(yǎng)前后，除Mn消耗明顯外，其余元素?zé)o明顯變化。 在樣品的消解方法上，本試驗(yàn)提出了新的較為方便