新的抑癌候選基因NDRG2對(duì)前列腺癌的增殖抑制作用.pdf

1、研究背景及目的：
　　前列腺癌是歐美國(guó)家男性最常見惡性腫瘤，高居致死惡性腫瘤的第二位。近年來在我國(guó)有逐年增加的趨勢(shì)。如果前列腺癌能夠被早期診斷，并采取積極的根治術(shù)、雄激素阻斷治療或放射治療，前列腺癌患者會(huì)獲得更好的預(yù)后和更高的生存率。但是不幸的是，多數(shù)前列腺癌發(fā)現(xiàn)是已經(jīng)處于晚期，錯(cuò)過了最佳的治療時(shí)機(jī)，最終由于對(duì)激素的非依賴性，而導(dǎo)致腫瘤的進(jìn)展惡化而導(dǎo)致腫瘤的不可治愈，導(dǎo)致患者死亡。所以說找到有效的前列腺癌早期診斷和治療的方法至關(guān)重

2、要。
　　NDRG2最初在N-Myc基因敲除小鼠中必備發(fā)現(xiàn)，并被命名為N-Myc下游調(diào)節(jié)基因。NDRG家族包括四個(gè)成員，NDRG1,NDRG2,NDRG3andNDRG4。NDRG家族的四個(gè)成員的氨基酸同源性達(dá)到了57-65％，表明NDRG家族的結(jié)構(gòu)保守，可能有著重要的功能。人源NDRG2是我校生化實(shí)驗(yàn)室首先發(fā)現(xiàn)并命名的(AF159092)，并被證明是新的抑癌候選基因。NDRG2位于14q11.2包括16個(gè)外顯子和15個(gè)內(nèi)含子。N

3、DRG2mRNA全長(zhǎng)2024個(gè)bp，編碼含有357個(gè)氨基酸序列的功能未知蛋白(41kDa)。前期研究發(fā)現(xiàn)NDRG2的表達(dá)在一系列的腫瘤組織中表達(dá)降低，這些腫瘤包括結(jié)腸癌、甲狀腺癌、膠質(zhì)細(xì)胞瘤和腎透明細(xì)胞癌，這表明NDRG2在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮重要的作用。同時(shí)還有證據(jù)證明NDRG2參與了細(xì)胞增殖和分化的調(diào)節(jié)。NDRG2能夠調(diào)節(jié)肌原細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞的分化。
　　由于NDRG2是這樣一個(gè)可能參與腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要基因

4、，而目前國(guó)內(nèi)外尚無NDRG2和前列腺癌相關(guān)性的報(bào)道，所以我們決定檢測(cè)NDRG2在前列腺癌組織中的表達(dá)情況，研究其在前列腺癌發(fā)生發(fā)展過程中起到的作用。
　　研究方法及內(nèi)容：
　　本研究先采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)144例前列腺腫瘤（37例前列腺增生組織/107例前列癌組織）組織染色，檢測(cè)NDRG2在前列腺腫瘤中的表達(dá)情況。采用RT-PCR和Westernblot方法檢測(cè)不同前列腺癌細(xì)胞系中NDRG2的表達(dá)水平。采用腺病毒介導(dǎo)的方式

5、實(shí)現(xiàn)NDRG2在前列腺癌PC3細(xì)胞中的瞬時(shí)過表達(dá)，并考察其過表達(dá)對(duì)PC3細(xì)胞增殖的影響，檢測(cè)的方法包括繪制細(xì)胞、腫瘤生長(zhǎng)曲線，免疫組化，流式細(xì)胞儀，透射電鏡和TUNEL染色。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　結(jié)果表明NDRG2在前列腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率和表達(dá)水平均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于前列腺增生組織(χ2=25.98,p＜0.001)，并且NDRG2的表達(dá)水平與前列腺癌的Gleason評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（r=－0.445,p＜0.001)，與相應(yīng)前列腺癌

6、組織中c-Myc的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=－0.311,p<0.001)。其表達(dá)水平與前列腺癌的pTNM分期和血清PSA無關(guān)(P>0.05)。前列腺癌細(xì)胞系中的NDRG2表達(dá)水平低于人正常唾液腺細(xì)胞，其中PC3細(xì)胞中表達(dá)水平的最低，pAd-cmv-NDRG2腺病毒介導(dǎo)的PC3細(xì)胞中NDRG2的過表達(dá)，在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中都表現(xiàn)出對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用，并可調(diào)節(jié)細(xì)胞G1期相關(guān)因子（CyclinD1、CDK4）和凋亡相關(guān)因子（p21）的表達(dá)。