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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察鹽霉素對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞及其干細(xì)胞體外增殖的影響和對(duì)腫瘤干細(xì)胞基因表達(dá)的影響;初步探討鹽霉素體外作用于前列腺癌PC-3腫瘤干細(xì)胞的可能機(jī)制。
方法:1、用含160、80、40ug/ml等10個(gè)不同濃度的鹽霉素作用前列腺癌PC-3腫瘤細(xì)胞,以紫杉醇陽(yáng)性對(duì)照,MTT法檢測(cè)出半效濃度(IC50,μg/ml)及最大抑制率(Imax)并繪制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)曲線;2、將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的前列腺癌 PC-3細(xì)胞分為空白對(duì)照組、溶媒對(duì)照組
2、與實(shí)驗(yàn)組,鹽霉素作用24小時(shí)后,以“CD133+、CD44+”雙陽(yáng)性細(xì)胞作為腫瘤干細(xì)胞,通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行干細(xì)胞比例分析并分選;3、提取每組腫瘤干細(xì)胞總的RNA,用micorarray技術(shù)對(duì)各組基因表達(dá)進(jìn)行分析,找出表達(dá)差異2倍、10倍及以上的基因,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:(1)、測(cè)得鹽霉素對(duì)前列腺癌 PC-3細(xì)胞的IC50為9.18±6.66 ug/ml,Imax=99.35%;(2)、流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示空白對(duì)照組腫瘤
3、干細(xì)胞比例均值為0.83%,溶媒組腫瘤干細(xì)胞比例均值為0.81%,實(shí)驗(yàn)組腫瘤干細(xì)胞比例均值為0.46%,通過(guò)兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn),空白對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),而空白對(duì)照組與溶媒組之間差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);(3)、micorarray分析結(jié)果顯示,上調(diào)2倍基因1574個(gè),下調(diào)2倍基因1666個(gè),上調(diào)10倍及以上的基因有26個(gè),下調(diào)10倍及以上的基因有21個(gè),其中與腫瘤干細(xì)胞凋亡、生長(zhǎng)以及腫瘤耐藥等生
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