粘類小麥雄性不育基因rfv-,1-定向?qū)氲难芯?pdf

1、小麥作為世界第一大糧食作物，有著明顯的雜種優(yōu)勢(shì)，有效利用其雜種優(yōu)勢(shì)，是提高小麥產(chǎn)量的一條重要途徑。目前小麥雜種優(yōu)勢(shì)利用主要有三系法(即質(zhì)核互作雄性不育法)、兩系法和殺雄劑法等，經(jīng)眾多研究者長(zhǎng)期探索都得到了長(zhǎng)足的發(fā)展。其中，特別是粘類非1BL/1RS不育類型，完全克服了以往1BL/1RS不育類型的諸多缺點(diǎn)，大大提高了其不育系的易恢復(fù)性和恢復(fù)度。本研究正是針對(duì)粘類非1BL/1RS不育類型所具有的優(yōu)點(diǎn)，旨在將粘類非1BL/1RS不育類型盡快推

2、向生產(chǎn)應(yīng)用，為利用粘類小麥雄性不育系組配小麥強(qiáng)優(yōu)勢(shì)組合，并早日投入生產(chǎn)應(yīng)用提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。 試驗(yàn)選取攜有粘類小麥不育基因rfv<,1>的非1BL/1RS普通小麥變種‘莫迦’(T.machavar．subletsohchumicum)和‘SP<,4>’(T.machavar．subletsohchumicum)為供體，已組配出的化殺強(qiáng)優(yōu)勢(shì)組合母本‘西農(nóng)Fp1’‘西農(nóng)Fp2’為染色體定向轉(zhuǎn)換受體，采用傳統(tǒng)核置換回交轉(zhuǎn)育法、細(xì)

3、胞遺傳鑒定、SDS-PAGE技術(shù)等，將‘莫迦’、‘SP<,4>’小麥核基因組中1BS上的rfv<,1>基因定向?qū)氲叫柁D(zhuǎn)育的母本中，以創(chuàng)制出用以粘類小麥雄性不育系育性基因定向替換新技術(shù)，以及建拓粘類小麥不育系新途徑。 通過(guò)研究獲得如下重要結(jié)果： 1.雜交以及回交后代鑒定方法的改進(jìn)：依據(jù)供體、受體染色體構(gòu)型，本試驗(yàn)采用根尖染色體隨體鑒定法和SDS-PAGE技術(shù)對(duì)雜交以及回交后代進(jìn)行鑒定，為了獲得更為可靠的鑒定結(jié)果，試驗(yàn)特對(duì)

4、這兩種方法進(jìn)行了改進(jìn)。研究認(rèn)為將常規(guī)根尖隨體鑒定法輔之于根尖同步化可得到較多的中期分裂相，利于更準(zhǔn)確的鑒定染色體構(gòu)型，該方法與改良的SDS-PAGE技術(shù)相結(jié)合，可互相印證，相互補(bǔ)充，以進(jìn)一步保證鑒定結(jié)果的真實(shí)、準(zhǔn)確。 2.將rfv1導(dǎo)入到具有1BL/1RS核型母本‘西農(nóng)Fp1’：本試驗(yàn)采用上述兩種方法對(duì)rfv1的導(dǎo)入與否進(jìn)行了鑒定，研究表明，供體‘莫迦’為具有非1BL/1RS染色體核型，受體‘西農(nóng)Fpl’為具有l(wèi)BL／1RS染色

5、體核型，同時(shí)州％不育基因與1B隨體連鎖，由此雜交及回交后代細(xì)胞染色體有3個(gè)隨體者為攜帶有．Rfv，的個(gè)體。同時(shí)試驗(yàn)結(jié)合SDS-PAGE電泳分析，認(rèn)為若雙親同時(shí)具有特征帶7+8、7+9，則可確定同時(shí)含有1BL／1RS和1<'rfv1>染色體，更進(jìn)一步確認(rèn)rfv1基因的導(dǎo)入。 3.將rfv1導(dǎo)入到非1BL/1RS不育系‘西農(nóng)Fp2’：本試驗(yàn)選用‘SP4’為rfv1基因供體，‘西農(nóng)Fp2’為受體，采用細(xì)胞學(xué)鑒定和SDS—PAGE技術(shù)，

6、并輔之于測(cè)交來(lái)鑒定州啊基因是否導(dǎo)入受體。結(jié)果表明，供體‘SP<,4>’、受體‘西農(nóng)Fp2’均為具有非1BL/1RS染色體核型，根尖鏡檢無(wú)法鑒定出兩者在染色體隨體上的差異性。鑒于此，采用SDS-PAGE電泳分析對(duì)雜交以及回交后代進(jìn)行鑒定，認(rèn)為若同時(shí)具有雙親特征帶7+8、6+8，則可確定同時(shí)含有1B和1Br<'rfvl>染色體，即導(dǎo)入了rfv<,1>基因。同時(shí)，采用不育系測(cè)交的方法驗(yàn)證SDS-PAGE電泳鑒定的準(zhǔn)確性。 4.新型非1