姜黃素對大鼠腦缺血再灌注損傷MMP-9及TNF-α表達的影響.pdf

1、實驗?zāi)康模河^察大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）隨腦缺血再灌注損傷（ischemic reperfusion injury）時間表達變化的情況以及不同劑量姜黃素（curcumin，cur）對兩者表達的影響：探討姜黃素的腦保護作用機制，為該藥的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 研究方法：采

2、用四血管阻斷法制作Sprague-dawley（SD）大鼠全腦缺血再灌注損傷模型。實驗分為假手術(shù)組（Sham組）、缺血組（I/R組）、姜黃素預(yù)處理組（Cur組）；其中姜黃素預(yù)處理組又分為30、100、300 mg/kg三劑量亞組（Cur30，Cur100，Cur300），均在缺血前1小時腹腔注射給藥。上述實驗組再按再灌注時間2h、6h、1d、3d、7d五個時間點分為5個亞組，每組10只大鼠。試驗結(jié)束后處死大鼠，制備大鼠海馬石蠟標(biāo)本。HE

3、染色后光鏡觀察海馬CA1區(qū)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；免疫組化法檢測海馬CA1區(qū)MMP-9及TNF-α的表達。 結(jié)果：1．光鏡觀察：Sham組海馬各區(qū)錐體細(xì)胞排列整齊，邊界清楚，核膜邊界清晰，核仁深染、清晰。I/R組細(xì)胞輪廓消失，大部分細(xì)胞出現(xiàn)胞漿固縮，核固縮、碎裂等變性表現(xiàn)。變性神經(jīng)細(xì)胞周圍見較多的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤，增生的少突膠質(zhì)細(xì)胞圍繞變性神經(jīng)元細(xì)胞。Cur組70%細(xì)胞邊界基本清楚，核形狀基本規(guī)則，核邊界基本清晰，但少

4、數(shù)細(xì)胞出現(xiàn)核染色變深，胞漿部分消失等變性表現(xiàn)。神經(jīng)細(xì)胞周圍見少數(shù)的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤。 2．MMP-9表達的變化：Sham組海馬CA1區(qū)各時間點無MMP-9陽性細(xì)胞表達。I/R組和Cur各組再灌注2h點亦無MMP-9陽性細(xì)胞出現(xiàn)。I/R組在再灌注6h后可見MMP-9的表達（17．56±4．62），并隨再灌注時間而表達逐漸增多，再灌注1d其表達值達最高峰（49．52±10．28），3d時表達明顯較前兩時點減少（36

5、．52±8．71），7d時則更低（12．68±3．06）。各時間點間比較均有顯著性差異（P<0．05）。與I/R組相比，Cur各亞組海馬CA1區(qū)MMP-9的表達規(guī)律與I/R組相似，即在再灌注后6h開始表達，1d達表達高峰后開始回落，至7d降至最低水平。Cur30組、Cur100組、Cur300組海馬CA1區(qū)在再灌注后6h、1d、3d、7d四點MMP-9的表達水平均明顯低于相應(yīng)時間點I/R組（P<0．05），且在1d，3d點表達水平Cur

6、100組

7、注2h明顯增多（與Sham組相比，P<0．05），6h達高峰，3d、7d時也呈進一步減少趨勢，各時間點間統(tǒng)計學(xué)比較均有顯著性差異（P<0．05）。Cur30組、Cur100組、Cur300組海馬CA1區(qū)再灌注后6h、1d、3d、7d四點TNF-α的表達水平均明顯低于I/R組（P<0．05），且在6h，1d，3d點表達水平Cur100組