阿司匹林對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后VEGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）又稱血管通透因子，是體內(nèi)一種強(qiáng)效促血管生成因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。VEGF能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)其增殖，直接或間接參與血管生成，增強(qiáng)血管通透性。VEGF還能直接作用于神經(jīng)細(xì)胞，通過(guò)IP3K/Akt/NF-κB和MAPK/ERK信號(hào)途徑介導(dǎo)發(fā)揮神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用，包括減少凋亡，促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、遷移和分化以及改善神經(jīng)功能。阿司匹林（ASA）是經(jīng)典的抗甾體藥物，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，ASA具有直接的神經(jīng)保護(hù)作

2、用：增加ATP產(chǎn)量，抑制谷氨酸釋放，改善腦組織的能量代謝，抑制iNOS表達(dá)和促進(jìn)nNOS表達(dá)，抑制NF-κB的激活，清除自由基，增強(qiáng)cdk5/P53活性，抑制離子通道，阻止Zn2+內(nèi)流等。我們以前的研究證明，ASA能增加線粒體UCP4和ATPase6的表達(dá)，抑制凋亡途徑中的Fasl和caspase-3，上調(diào)Bcl-2/bax，抑制炎癥反應(yīng)以及增加腦組織內(nèi)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子如BDNF、NGF、bFGF、neurgulin，等的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)通

3、過(guò)觀察大鼠局灶性腦缺血-再灌注（CI/RP）后VEGF表達(dá)規(guī)律及阿司匹林對(duì)其表達(dá)的影響，探討阿司匹林的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。 方法：采用改良Zea Longa線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈（MCA）的CI/RP動(dòng)物模型。CI/RP后6h，Bederson神經(jīng)功能缺損評(píng)分在1-3分的大鼠為陽(yáng)性入選標(biāo)準(zhǔn)，其他大鼠剔除在外。部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦組織切片做TTC染色，證實(shí)模型成功。依照再灌注時(shí)間分為A（0h）、B（6h）、C（24h）、D（48天）、E（3

4、天）、F（5天）和G（7天）7個(gè)ASA組及相應(yīng)的對(duì)照組（A’-G’）。ASA組于CI/RP術(shù)后立即腹腔注射ASA80mg/kg.d作為干預(yù)因素，直至預(yù)定的處死時(shí)間；對(duì)照組腹腔注射等量的賴氨酸溶液。各時(shí)間點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。HE染色后光鏡下觀察缺血后不同時(shí)間點(diǎn)梗死側(cè)病理改變。利用免疫組化方法觀察CI/RP后腦組織中VEGF表達(dá)情況。 結(jié)果：CI/RP后6h開(kāi)始，ASA組及對(duì)照組大鼠肢體功能均有不同程度的恢復(fù)，ASA組

5、各個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠肢體功能恢復(fù)情況均優(yōu)于對(duì)照組，在第3天后有顯著性差異（P<0.05），第7天時(shí)有十分顯著差異（P<0.01）。CI/RP后，VEGF主要在梗死側(cè)缺血周邊區(qū)表達(dá)，神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞均有表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞免疫組化染色呈棕色。在ASA組及對(duì)照組，VEGF表達(dá)的趨勢(shì)是一致的，CI/RP后6h即有表達(dá)增加，24h表達(dá)增加明顯（P<0.05），48h達(dá)高峰，其后逐漸減少。ASA組VEGF表達(dá)高于對(duì)照組，24h～3天有顯著性差異