pAKt在控制性超排卵小鼠及人種植窗期子宮內(nèi)膜的表達變化及意義.pdf

1、目的1: 研究磷酸化(pAKt)與白血病抑制因子(LIF)在自然周期組和超排卵組小鼠著床期子宮內(nèi)膜的表達變化，探討控制性超排卵對子宮內(nèi)膜容受性的影響以及pAKt與子宮內(nèi)膜容受性可能的相關(guān)性。 目的2：研究pAKt與LIF在不明原因性不孕癥和雙側(cè)輸卵管阻塞婦女著床期子宮內(nèi)膜表達變化以及不明原因性不孕癥婦女著床期子宮內(nèi)膜pAKt表達變化與子宮內(nèi)膜容受性可能的相關(guān)性。 方法1:將:48只雌鼠分為兩組，超排卵組和自然周期組。超

2、排卵組小鼠在黃體期每日上午9時腹腔內(nèi)注射阿拉瑞林連續(xù)9天，第9天同時注射孕馬血清 (PMSG)，48h后注射人絨毛膜促性腺激素 (hCG)，自然周期組小鼠每日做陰道涂片確定排卵期。超排卵組小鼠在注射hCG日晚、自然周期組在排卵日晚雌雄2:1合籠，次晨發(fā)現(xiàn)陰道栓者為妊娠第一天，每天每組預(yù)計標記3只妊娠小鼠，共標記6天，每只妊娠及未妊娠小鼠均予以標記。除妊娠第四天小鼠于當(dāng)天夜間23:00-24:00時頸椎脫臼法處死取子宮，其余各組小鼠于當(dāng)天

3、9:00處死取子宮，妊娠第5、第6天的小鼠子宮需剔除著床點囊胚。用鏈菌素親生物素-過氧化酶連接法( SP)免疫組化法確定pAKt與LIF的組織學(xué)定位及半定量表達。 方法2:收集18份原發(fā)性不孕癥、不明原因性不孕癥婦女黃體中期子宮內(nèi)膜組織作為研究對象，并收集30份繼發(fā)性不孕癥、雙側(cè)輸卵管阻塞患者黃體中期子宮內(nèi)膜組織作為對照。用SP免疫組化法確定兩組患者子宮內(nèi)膜pAKt與LIF的組織學(xué)定位及半定量表達。 結(jié)果1:(1)LIF

4、在兩組小鼠著床期子宮內(nèi)膜的表達主要定位在腔上皮和腺上皮胞漿；pAKt在小鼠著床期子宮內(nèi)膜的表達主要位于間質(zhì)細胞且呈胞漿強表達；兩組小鼠子宮內(nèi)膜LIF蛋白半定量表達分析：超排卵組較自然周期組明顯降低 ，妊娠組較未妊娠組明顯增高；pAKt蛋白在兩組小鼠子宮內(nèi)膜半定量表達分析：超排卵組較自然周期組明顯降低，妊娠組較未妊娠組明顯增高；。 結(jié)果2：LIF在兩組患者子宮內(nèi)膜的表達均主要定位在腔上皮和腺上皮胞漿；pAKt在兩組患者子宮內(nèi)膜的

5、表達主要位于間質(zhì)細胞且呈胞漿強表達；兩組患者子宮內(nèi)膜LIF與pAKt蛋白表達半定量分析(SP免疫組化法)：不明原因性不孕癥患者子宮內(nèi)膜LIF與pAKt表達量較雙側(cè)輸卵管阻塞患者明顯降低；兩組患者中IVF/ICSI后未妊娠者子宮內(nèi)膜LIF與pAKt表達量較妊娠者明顯降低。 結(jié)論1: 控制性超排卵可降低pAKt與LIF在小鼠著床期子宮內(nèi)膜的表達；pAKt在小鼠著床期子宮內(nèi)膜的表達變化與LIF基本相一致，推測pAKt可能是影響子宮