吸煙對哮喘的影響以及SIRT1在淋巴細胞炎癥反應中的作用研究.pdf

1、[目的]：
　　研究吸煙對哮喘患者在哮喘控制、氣道炎癥指標的影響，SIRT1與吸煙哮喘患者血液學檢查指標、肺功能之間的相關性。在CSE誘導的淋巴細胞炎癥模型上研究SIRT1的作用，探討SIRT1是否能成為評估吸煙哮喘患者病情嚴重程度指標以及未來治療的靶位點。
　　[方法]：
　　一.選取來自廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科門診確診為哮喘的患者共96例，其中非吸煙組56例，吸煙組40例，18例正常對照組。收集研究對象一般資料，

2、對哮喘患者進行ACT評分(Asthma Control Test，ACT)，抽取研究對象外周靜脈血檢測血清總IgE、嗜酸性粒細胞直接計數(shù)（eosinophil count)、檢測肺功能，計算第一秒末用力肺活量(Forced Expiratory Volume in1 second，F(xiàn)EV1)占預計值百分比和第一秒用力呼氣容積（Forced Vital Capacity，F(xiàn)VC）占用力肺活量(FEV1)百分比，即FEV1％預計值(Pred

3、icted Values of Forced ExpiratoryVolume in1 second, FEV1％Pred)。
　　二.招募24位志愿者，分為正常組（7例）、正常吸煙組（5例）、哮喘組（8例）、吸煙哮喘組（4例），抽取24位志愿者靜脈血并檢測肺功能(FEV1％)。分離外周血淋巴細胞，實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)檢測各組淋巴細胞SIRT1的表達水平。統(tǒng)計分析各組SIRT1

4、表達水平與肺功能的相關性。
　　三.CSE建立吸煙誘導淋巴細胞炎癥模型，Q-PCR檢測SIRT1、IL-8因子的mRNA表達情況。
　　[結(jié)果]：
　　1.哮喘組與對照組的年齡(t=-1.619，P=0.130)、性別(x2=1.202，P=0.216)均無顯著差異(P＞0.05)，哮喘組的FEV1％預計值(t=-3.518，P=0.002)、ACT評分(t=-2.12，P=0.032)、EO＃(z=-3.421，P=

5、0.001)較對照組均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而哮喘組與對照組的血清總IgE濃度水平(z=-1.524，P=0.132)無顯著差異（P＞0.05）。
　　2.吸煙哮喘組、非吸煙哮喘組的FEV1％預計值、ACT評分差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其中FEVI％(69.75±19.56)，較非吸煙哮喘患者(78.01±17.81)低，兩者比較差異具有明顯的統(tǒng)計學意義(P＜0.001)。1年內(nèi)哮喘急性發(fā)作次數(shù)(2.67±3.

6、48次)較非吸煙哮喘組(1.87±2.95次)多;平均吸入糖皮質(zhì)激素(inhaledcorticosteroid， ICS)的使用量(454.55±103.35) ug/d較非吸煙哮喘組(382.37±152.03) ug/d多(P＜0.05)，具有統(tǒng)計學差異。而EOS、IgE無差異(P＞0.05)。
　　3.Q-PCR檢測24個樣本的相關因子表達，SIRT1在哮喘組、吸煙哮喘組較正常人組均顯示有不同程度的升高(P＜0.5)，以哮

7、喘組升高最明顯（P＜0.5），吸煙組較正常組SIRT1增加(P＜0.5)。吸煙哮喘組與非吸煙哮喘組比較，SIRT1下降（P＞0.5）和肺功能較降低(P＜0.5)。24位志愿者的SIRT1水平和肺功能中等負相關(P＜0.05，r=-0.453)，所有吸煙者（哮喘吸煙組和吸煙組）SIRT1水平和肺功能明顯負相關(p＜0.05,r=-0.56)。
　　4.用3％、6％的CSE處理從樣本分離的淋巴細胞24小時，Q-PCR檢測炎癥因子IL-

8、8、SIRT1的表達，結(jié)果顯示，3％CSE刺激下與對照組相比，IL-8的表達明顯升高約20倍，差異具有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，SIRT1表達升高，其中3％CSE作用下約升高4倍(P＜0.05)，6％CSE作用下約升高2倍(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]：
　　1.哮喘使患者的肺功能下降，而吸煙更加重了哮喘患者的病情，使其氣道反應更加難以控制。
　　2.SIRT1在哮喘的氣道炎癥中是一種保護性因素，吸煙使SIR