大花金挖耳莖葉殺菌活性成分研究.pdf

1、為了進(jìn)一步研究大花金挖耳的殺菌活性，本論文采用活性跟蹤法，對(duì)大花金挖耳(Carpesium macrocephalum.)莖葉的殺菌活性成分進(jìn)行研究，以期為其殺菌活性成分研究和開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。本研究取得以下結(jié)果： 1試管預(yù)試法和圓形濾紙層析法系統(tǒng)預(yù)試，表明大花金挖耳莖葉中含有鞣質(zhì)、香豆素、酚性成分、甾體、萜類(lèi)、黃酮及其苷類(lèi)、多糖及苷類(lèi)、氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)以及揮發(fā)油、油脂類(lèi)等成分。 2采用工業(yè)甲醇對(duì)其進(jìn)行滲濾提取，濃縮提取

2、液，得甲醇浸膏，甲醇總浸膏用去離子水飽和懸浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇萃取，液濃縮后分別得石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、甲醇萃取物和水相。 3用活性追蹤方法，對(duì)大花金挖耳莖葉的殺菌活性成分進(jìn)行分離。分別從石油醚和氯仿萃取物中分離得到5個(gè)單體化合物，經(jīng)UV、IR、HRMS、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR方法鑒定化合物分別為：β-谷甾醇、4-羰基-卡拉布烷-11(13)-烯-12，8β-內(nèi)酯(天明精內(nèi)

3、酯酮)、4-羥基-卡拉布烷-11(13)-烯-12，8β-內(nèi)酯(天明精內(nèi)酯醇)、脂肪酸。 4采用生長(zhǎng)速率法、孢子萌發(fā)法和果實(shí)針刺法對(duì)大花金挖耳莖葉甲醇提取物的4種溶劑萃取物殺菌活性進(jìn)行較為系統(tǒng)的測(cè)試。結(jié)果表明，4種溶劑萃取物對(duì)供試病原真菌孢子萌發(fā)及菌絲生長(zhǎng)均具一定抑制作用，其中氯仿萃取物活性最高，在1000mg/L劑量下對(duì)番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)抑制率分別為88.6％和90.1％；果實(shí)針刺法測(cè)試結(jié)果表明，大花金挖耳莖葉甲醇

4、粗提物的4種溶劑萃取物對(duì)番茄灰霉病均有一定的保護(hù)作用和治療作用，在2000mg/L劑量下，氯仿萃取物對(duì)番茄灰霉病菌保護(hù)和治療防效分別為78.9％和45.1％；在活體盆栽條件下，4種粗提物對(duì)小麥白粉病均有保護(hù)作用，石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、甲醇萃取物保護(hù)效果均大于60％。 5系統(tǒng)測(cè)定了4-羰基-卡拉布烷-11(13)-烯-12,8β-內(nèi)酯(天明精內(nèi)酯酮)、4-羥基-卡拉布烷-11(13)-烯-12，8β-內(nèi)酯(天明

5、精內(nèi)酯醇)的抑菌活性。離體殺菌活性測(cè)定表明，天明精內(nèi)酯酮對(duì)供試12種病原菌菌絲生長(zhǎng)均有較強(qiáng)的抑制活性；天明精內(nèi)酯酮對(duì)不同病菌孢子萌發(fā)的抑制效果存在明顯差異，對(duì)黃瓜炭疽孢子毒力最高，EC<,50>為6.9 mg/L；對(duì)小麥赤霉病菌和玉米大斑病菌孢子的抑制作用相對(duì)較弱，EC<,50>均大于200 mg/L。天明精內(nèi)酯酮對(duì)小麥白粉病、黃瓜白粉病和玉米大斑病均具良好防效。在濃度為2000mg/L時(shí)，天明精內(nèi)酯酮對(duì)3種病害的盆栽保護(hù)和治療效果均在