用煙草蝕紋病毒防治玉米矮花葉病的研究.pdf

1、玉米矮花葉病是玉米生產(chǎn)上的一類重要病毒病，在世界各玉米產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，長期以來一直嚴重影響著玉米的產(chǎn)量和質(zhì)量。在我國，自1968年首次報道河南新鄉(xiāng)發(fā)生玉米矮花葉病害以來，該病害在我國北部和西北部地區(qū)均大面積發(fā)生，玉米產(chǎn)量損失在20％～80％，已經(jīng)成為制約我國玉米生產(chǎn)的主要問題之一。本文在克隆玉米矮花葉病毒CP基因的基礎上，運用生物學和分子生物學手段研究了煙草蝕紋病毒(Tobacco etch virus,TEV)與甘蔗花葉病毒(Sugar

2、cane mosaic virus，SCMV)之間的交互保護作用，證實了TEV與SCMV之間存在交互保護作用的現(xiàn)象，這不僅為植物病毒馬鈴薯Y屬(Potyvirus)不同病毒間交互保護作用的研究奠定了基礎，而且也開拓了植物病毒病防治的新思路。 克隆了陜西分離物SCMV CP基因(登錄號為DQ846832)，其基因序列與浙江SCMVCP基因的核苷酸同源率為99.79％，氨基酸的同源率為100％。 在防蟲網(wǎng)室內(nèi)，對TEV與SC

3、MV交互保護作用設計了四種處理方式，處理I先用10％TEV保護接種玉米，7d后挑戰(zhàn)接種10％SCMV，結(jié)果表明玉米在初期葉面光滑，色澤均勻， 10d后僅有13.8％的植株開始輕微褪綠，處理Ⅱ只挑戰(zhàn)接種SCMV作為陽性對照的玉米，在前期心葉表現(xiàn)出褪綠癥狀，后期植株為典型玉米矮花葉癥狀；10d后全部發(fā)病。處理Ⅲ只保護接種TEV的玉米無癥狀，處理Ⅳ不接種任何病毒的玉米生長狀況良好，健康無癥狀。 通過PCR檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，從只接種SCM

4、V的玉米植株中擴增片段大小約為1.1kb，確定為SCMV CP基因；從先接種TEV再接種SCMV植株中同樣檢測到該基因，但條帶較弱，而不接種任何病毒植株對照均未出現(xiàn)特異性擴增條帶。 進一步用實時熒光定量PCR檢測，以只挑戰(zhàn)接種的陽性對照為參照因子，其2<'-△△>u值是經(jīng)18S rRNA校正后1倍量的目的基因表達，AACt=0，2<'-△△ct>=1，對于處理組的樣品，相對于參照因子目的基因表達的倍數(shù)為2<'-△△ct>。經(jīng)保護