肝癌組織中螺桿菌感染與相關(guān)基因檢測研究.pdf

1、本文通過細(xì)菌培養(yǎng)分子生物學(xué)技術(shù)探討人類原發(fā)性肝癌(PLC)中螺桿菌感染與相關(guān)基因的檢測，為肝癌的致病機(jī)理和防治尋找有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 方法：1、選取48例PLC患者的肝癌組織為實(shí)驗(yàn)組，29例其他肝病患者肝組織和30例胃癌患者胃癌組織、20例結(jié)直腸癌、20例子宮肌瘤作對照組。采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測螺桿菌屬16SrRNA基因、相關(guān)功能基因cagA和vacA，16SrRNA的擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)Southern雜交確認(rèn)，并將PCR

2、產(chǎn)物進(jìn)行測序及同源性比較。2、應(yīng)用哥倫比亞培養(yǎng)基分離培養(yǎng)癌組織中的螺桿菌，對培養(yǎng)陽性標(biāo)本進(jìn)行染色、尿素酶檢測鑒定，進(jìn)一步檢測16SrRNA、cagA和vacA基因。通過以上方法綜合評價(jià)螺桿菌感染與PLC的相關(guān)性。 結(jié)果：1、肝癌組分離出5株螺桿菌，分離陽性率10.42％，胃癌組7株，分離陽性率23.33％。經(jīng)革蘭染色、尿素酶、16SrRNA基因檢測、Southern雜交和序列測定證實(shí)為Hp感染。2、48例原發(fā)性肝癌標(biāo)本中有29例