氯氰菊酯免疫毒性機(jī)制的初步研究.pdf

1、擬除蟲(chóng)菊酯是有機(jī)磷、有機(jī)氯等化學(xué)合成殺蟲(chóng)劑的替代產(chǎn)品，目前被廣泛使用。而且大量被用于室內(nèi)衛(wèi)生殺蟲(chóng)，人類(lèi)面臨著擬除蟲(chóng)菊酯的暴露風(fēng)險(xiǎn)日益增大，因而對(duì)其進(jìn)行全面的安全性評(píng)價(jià)非常必要。以往的研究多集中在其神經(jīng)毒性上，對(duì)其免疫毒性關(guān)注較少。氯氰菊酯是擬除蟲(chóng)菊酯的代表，除了作殺蟲(chóng)用途以外還有其特點(diǎn)。即在研究中，氯氰菊酯與免疫抑制藥物環(huán)孢菌素A(CsA)和他可莫司(FK506)一樣，可被用作鈣調(diào)磷酸酶的特異性抑制劑。而鈣調(diào)磷酸酶在免疫相關(guān)的多條信號(hào)通

2、路激活中發(fā)揮重要作用，因此選擇氯氰菊酯作為研究對(duì)象，有可能較深入地揭示擬除蟲(chóng)菊酯的免疫毒性機(jī)制。
　　 因?yàn)轸~(yú)類(lèi)是較低等的脊椎動(dòng)物，在先天性免疫研究中有獨(dú)特作用；而且魚(yú)類(lèi)較其它動(dòng)物對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯更為敏感。而斑馬魚(yú)又是OECD標(biāo)準(zhǔn)化的評(píng)價(jià)外源化合物毒性的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，因此本研究中使用斑馬魚(yú)作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
　　 用氯氰菊酯對(duì)斑馬魚(yú)染毒，觀察其急性毒性，確定氯氰菊酯半數(shù)致死濃度位于10μg/L～18μg/L之間。使用相對(duì)定量RT-P

3、CR方法研究氯氰菊酯96h染毒后，nfat信號(hào)途徑和wnt信號(hào)途徑上相關(guān)分子的轉(zhuǎn)錄相對(duì)水平。并使用gsk3B的激酶活性阻斷劑Li+單獨(dú)或與氯氰菊酯合并染毒，用同樣方法研究其轉(zhuǎn)錄變化。
　　 結(jié)果顯示Li2CO3溶于飼養(yǎng)水單獨(dú)作用能抑制斑馬魚(yú)gsk3β的轉(zhuǎn)錄，與Li+作為gsk3B激酶活性高效抑制劑的結(jié)果一致。氯氰菊酯單獨(dú)染毒后，rcanl和il-1β轉(zhuǎn)錄都有上調(diào)。而Li2CO3與氯氰菊酯合并染毒上調(diào)il-1β轉(zhuǎn)錄的程度較二者單獨(dú)

4、作用高，在一定程度顯示加合效應(yīng)。與預(yù)期不符的是，氯氰菊酯對(duì)il-1β的轉(zhuǎn)錄上調(diào)。
　　 因此氯氰菊酯的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)可能不是通過(guò)其對(duì)CaN的抑制發(fā)生的，而更可能與氯氰菊酯造成的細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高相關(guān)。而且Li2CO3直接對(duì)斑馬魚(yú)染毒，也能產(chǎn)生與對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞作用一致的gsk3B阻斷作用。氯氰菊酯染毒也能顯著誘導(dǎo)wnt10b的轉(zhuǎn)錄。以上結(jié)果提示，氯氰菊酯對(duì)斑馬魚(yú)的免疫毒性機(jī)制中，可能通過(guò)Ca2+和gsk3B等關(guān)鍵成員，整合nfat和