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1、第一章 ?;鵆oA:膽固醇?;D(zhuǎn)移酶1(ACAT1)在泡沫細(xì)胞形成中的作用研究;第一節(jié) 泡沫細(xì)胞形成過(guò)程中ACAT活性改變及其機(jī)制研究;目的 研究人單核細(xì)胞系在分化為巨噬細(xì)胞及轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞過(guò)程中酰基CoA:膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(ACAT)活性的改變及其機(jī)制.方法 體外培養(yǎng)人THP-1單核細(xì)胞系,由佛波酯(PMA)作用使其分化為巨噬細(xì)胞,后者再由氧化或乙?;揎椀牡兔芏戎鞍走M(jìn)一步作用轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞.此過(guò)程中以放射性同位素標(biāo)記底物法檢測(cè)AC
2、AT酶活性的變化,并用Western blot法檢測(cè)ACAT1酶蛋白的表達(dá)及RT-PCR法檢測(cè)ACAT1 mRNA的水平.第二節(jié) 過(guò)表達(dá)ACAT1基因?qū)ε菽?xì)胞形成的影響;目的 研究在幾種不同細(xì)胞中過(guò)表達(dá)ACAT1基因?qū)ε菽?xì)胞形成的影響.方法ACAT1基因轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的人THP-1單核細(xì)胞系、小鼠RAW264.7單核巨噬細(xì)胞系和人胚腎293上皮細(xì)胞系,由Ac-LDL進(jìn)一步作用,以油紅O染色法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后泡沫細(xì)胞的形成情況.第二章 腫瘤
3、壞死因子α和白細(xì)胞介素1β對(duì)ACAT酶活性的影響及機(jī)制研究;第一節(jié) 腫瘤壞死因子α促進(jìn)ACAT酶活性的上升及其機(jī)制研究;目的 研究THP-1巨噬細(xì)胞中腫瘤壞死因子α(TNF-α)對(duì)乙酰輔酶A:膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性的影響及其機(jī)制.第二節(jié) 白細(xì)胞介素1β對(duì)ACAT酶活性的影響研究;目的 研究動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)對(duì)乙酰輔酶A:膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(ACAT)活性的影響及其機(jī)制.第三章 抑制ACAT酶活性對(duì)
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