版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、檳榔堿是從檳榔中提取的生物堿,為M膽堿受體激動劑。檳榔堿作用于細胞膜,可與相應受體結合,通過蛋白偶聯后開放細胞膜離子通道,增加細胞內鈣離子濃度,對結腸運動具有一定的促進作用。大量的研究表明,離子通道的調控異??蓪е挛改c道動力障礙。因此,研究檳榔堿對結腸平滑肌離子通道表達的影響對結腸運動功能障礙具有重要意義。本實驗通過研究離子通道在基因水平上即mRNA表達的影響,進一步分析檳榔堿從分子水平上對平滑肌細胞的影響及作用機制。
目
2、的:
本課題運用分子生物學方法,研究檳榔堿對大鼠結腸平滑肌運動的調節(jié)作用,說明藥物對離子通道m(xù)RNA表達的影響,闡釋檳榔堿對大鼠結腸平滑肌細胞運動的分子生物學機制,從分子生物學上驗證對結腸動力促進的作用,為進一步闡釋檳榔堿對細胞內信號傳導及腸道動力的調節(jié)研究提供新思路,具有臨床應用前景。
方法:
本研究以健康標準體重30只Wistar大鼠為研究對象,正常飼養(yǎng)適應環(huán)境1周后,隨機分為4組:實驗組(
3、各8只),分別給以不同濃度檳榔堿(高、中、低濃度)灌胃:對照組6只,生理鹽水灌胃。均自由進飲食,分籠喂養(yǎng)于20-25℃明暗各12小時的動物實驗室內,飼養(yǎng)三周后禁食不禁水12小時,稱重并用10%水合氯醛(5ml/kg)腹腔注射致死,迅速解剖大鼠的末段結腸并游離平滑肌,生理鹽水沖洗后冰上操作,提取RNA,逆轉錄后用β-actin、鈣離子激活性鉀通道、電壓依賴性鈉通道β2亞基、L型鈣通道α亞基引物擴增,跑電泳,EB染色后用BN-TA2020D
4、全自動凝膠成像分析儀觀察,與對照組對比分析,用SPSS軟件分析各組表達有無差異,根據電泳結果的變化說明藥物對離子通道m(xù)RNA表達的影響。
結果:
1、鈣離子激活性鉀通道m(xù)RNA實驗組與對照組表達無明顯差異(P>0.05),高、中、低濃度實驗組內表達無明顯差異(P>0.05)。
2、電壓依賴性鈉通道m(xù)RNA實驗組與對照組表達無明顯差異(P>0.05),高、中、低濃度實驗組內表達無明顯差異(P>0.
5、05)。
3、L型鈣通道m(xù)RNA表達,不同濃度灌胃組鈣離子通道m(xù)RNA表達有明顯差異(P<0.01);實驗組與低濃度組無明顯差異(P>0.05),中濃度組與高濃度組較對照組、低濃度組表達明顯增高,有統(tǒng)計學意義(P<0.01),但高濃度組較中濃度組表達無明顯增高(P>0.05)。
結論:
1、用不同濃度的藥物給大鼠灌胃,使大鼠體內藥物濃度不同,方法簡單易行,對大鼠損害、刺激小,無明顯機體不良反應。
6、
2、mRNA的測定是在分子水平上研究基因表達的常用方法,RT-PCR則以其靈敏度高、專一性好、快速簡單的特點,可用來作為mRNA檢測的方法。
3、高濃度、中濃度檳榔堿灌胃可以上調L型鈣通道m(xù)RNA表達,但是低濃度檳榔堿對其影響不大;不同濃度檳榔堿灌胃對鈣離子激活型鉀通道及電壓依賴性鈉通道無明顯上調作用。
4、L型鈣通道與細胞收縮有直接關系,以往研究證實檳榔堿可以升高細胞內Ca2+濃度,并促進平
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 異丙酚對大鼠動脈平滑肌鈣激活鉀通道和鈣池操縱的鈣通道的作用.pdf
- P2受體對大鼠胃腸道平滑肌運動的調節(jié)作用.pdf
- 促結腸動力中藥的篩選研究及氫溴酸檳榔堿對大鼠離體結腸平滑肌細胞的作用研究.pdf
- 冷應激對大鼠血管平滑肌細胞鈣通道表達的影響.pdf
- 線粒體膜ATP敏感鉀通道對大鼠肺動脈平滑肌HIF-1a表達及細胞增殖的作用.pdf
- 血管鈉肽對大鼠腹主動脈平滑肌細胞ATP敏感鉀通道的作用.pdf
- 人足月妊娠子宮平滑肌大電導鈣敏感鉀通道的表達及其調節(jié).pdf
- 大鼠遠端結腸平滑肌鈣庫操縱性通道及其功能的研究.pdf
- 大電導鈣激活鉀通道在氯喹調節(jié)氣管平滑肌張力中的作用.pdf
- 檳榔堿對結腸平滑肌細胞內游離鈣離子濃度的影響.pdf
- 雌激素對大鼠陰道平滑肌細胞蘭尼堿受體1和l型鈣通道v1.3表達的影響
- 熱量限制對大鼠下丘腦和垂體組織電壓依賴性鈣通道表達的調節(jié)作用.pdf
- 有氧運動對增齡大鼠動脈平滑肌BKCa通道表達的影響.pdf
- 新型鉀通道開放劑QO-58對血管平滑肌的舒張作用.pdf
- 大鼠肺動脈平滑肌細胞中鉀通道和鈣通道的電生理特征以及在肺高壓中的變化.pdf
- 嗎啡對電壓門控鈣通道的選擇性調節(jié)作用.pdf
- ACAD對平滑肌肌球蛋白ATP酶活性的直接與間接調節(jié)作用研究.pdf
- TRP通道調節(jié)膽囊平滑肌收縮作用與其小分子調節(jié)劑篩選研究.pdf
- α-淀粉酶對大鼠心室肌和冠狀動脈平滑肌細胞L-型鈣通道電流的影響.pdf
- 大黃素、槲皮素對平滑肌及其肌球蛋白功能的調節(jié)作用研究.pdf
評論
0/150
提交評論