用低毒病毒—板栗疫病菌系統(tǒng)篩選抗病毒化合物的模型研究.pdf

1、藥物篩選模型是用于證明某種物質(zhì)具有藥理活性(生物活性、治療作用)的實驗方法，這些實驗方法是尋找和發(fā)現(xiàn)藥物的重要條件之一。理想的篩選方法應(yīng)該具有明顯的檢測標記，而且高效、簡便。但是對大多數(shù)RNA病毒而言，理想的篩選方法還非常缺乏。尤其在抗植物病毒和真菌病毒病的藥物開發(fā)方面，目前還沒有簡易、快速和高效的篩選方法。
　　 無病毒的絲狀真菌板栗疫病菌具有桔黃色的表型，而感染了低毒病毒(一種雙鏈RNA病毒)的板栗疫病菌則具有菌絲體為白色的

2、穩(wěn)定的表型。當(dāng)帶毒株失去可自主復(fù)制的低毒病毒時，菌絲體變?yōu)榻埸S色。
　　 本實驗利用這種顏色變化作為判斷病毒存在與否或其濃度水平的一個方便的初步標記。用市面有代表性的廣譜抗病毒藥物處理這種帶病毒菌株，然后根據(jù)用藥前后菌株顏色的變化，以及對用藥前后病毒進行熒光定量分析，從而判斷所用藥物對RNA病毒的復(fù)制是否有抑制作用，或?qū)κ躌NA病毒感染的真菌的癥狀是否有緩解作用。
　　 結(jié)果表明，在該系統(tǒng)中，抗病毒藥物對帶病毒株系處理后

3、，菌絲體顏色表型變化最為明顯，熒光定量結(jié)果表明病毒量的變化與菌絲體顏色變化存在相關(guān)性，即隨著藥物濃度的增加，菌絲體顏色逐漸加深，而病毒dsRNA的量則相對減少。其中在EP721/EP721(-)系統(tǒng)中最為明顯，Euro7/Euro7(-)系統(tǒng)中次之，而由于EP713中所帶病毒量較大，使得同樣藥物的量對其影響較小，因此在EP713/EP155系統(tǒng)中菌絲體顏色表型變化以及病毒量的變化不甚明顯。但考慮到EP721有脫毒的可能性，因此認為Eur