P2X3受體在咬合干擾大鼠下頜關(guān)節(jié)痛閾改變中的作用研究.pdf

1、目的:
　　了解咬合干擾動物模型建立后，大鼠顳下頜關(guān)節(jié)痛閾改變的情況以及P2X3受體在外周與中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)變化，并探究這二者的關(guān)系。進(jìn)一步探討顳下頜關(guān)節(jié)功能紊亂的病因機(jī)制，為臨床上顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的治療提供新的靶點和治療思路。
　　方法:
　　60只8周齡雄性Wistar大鼠（購于山東大學(xué)動物實驗中心），體重250-300g，隨機(jī)分為5個對照組（每組6只）與5個實驗組（每組6只），利用在大鼠右側(cè)下頜第一磨牙上粘固

2、鑄造冠的方法建立咬合干擾動物模型。建立模型后于第1，3，7，14，28天用Von Frey尼龍毛測量雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)的疼痛分值，然后分批處死，取雙側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)(Trigeminal ganglion，TG)和三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核(Subnuclei caudalis，Vc)，對相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測P2X3受體陽性細(xì)胞率;用熒光定量PCR(real-time PCR)法檢測組織中P2X3受體mRNA的相對表達(dá)量。另

3、用6只大鼠建模，在痛閾最低的時間點隨機(jī)選取3只局部注射P2X3受體拮抗劑A-317491，剩余3只注射生理鹽水，檢測其疼痛分值。
　　結(jié)果:
　　1)建模后，實驗大鼠的雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)的疼痛閾值均發(fā)生改變。痛覺過敏持續(xù)了整個實驗過程。在整個實驗過程中，實驗組的干擾側(cè)和非干擾側(cè)的疼痛分值在建模后各時間點均高于基準(zhǔn)線和對照組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，但是干擾側(cè)與非干擾側(cè)的疼痛分值之間未見明顯差異(p＞0.05)。在實

4、驗組大鼠的雙側(cè)，疼痛分值于咬合干擾模型建立后呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢，建模后第1天疼痛分值開始逐漸升高，在第7天時達(dá)到最高峰，之后疼痛分值逐漸下降;第7天的疼痛分值明顯高于其他時間點，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　2)建模后，實驗組雙側(cè)TG和Vc組織中的P2X3受體陽性細(xì)胞比例改變呈先升高后降低趨勢，與顳下頜關(guān)節(jié)疼痛分值改變類似。實驗組雙側(cè)TG組織中P2X3R陽性細(xì)胞比例在建模后第7天到達(dá)高峰，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜

5、0.05);而實驗組雙側(cè)Vc組織中P2X3R陽性細(xì)胞比例在第3天即達(dá)到高峰，并持續(xù)到第7天(p＜0.05)。
　　3)建模后在實驗組的雙側(cè)TG組織中，P2X3受體mRNA的相對表達(dá)量均高于對照組，并在第3天時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。在實驗組雙側(cè)Vc組織中，P2X3受體mRNA的相對表達(dá)量從建模后第1天開始即顯著升高，之后逐漸降低，且在建模后的第1，3，7天與對照組相比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
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