DHA通過Wnt-β-catenin信號(hào)通路抑制胃癌MGC-803細(xì)胞生長增殖.pdf

1、目的：探討二十二碳六烯酸（DHA）對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞生長增殖的作用及作用機(jī)制，為開發(fā)新的抗腫瘤藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1．體外培養(yǎng)胃癌MGC803細(xì)胞,分別采用1、10、30、60、100uMol/L濃度的DHA作用胃癌細(xì)胞MGC-80324h后，MTT法觀察細(xì)胞生長增殖抑制情況。
　　2．制備細(xì)胞爬片，免疫細(xì)胞化學(xué)染色，經(jīng)60uMol/L濃度的DHA處理MGC-803細(xì)胞24h后，觀察細(xì)胞β-cate

2、nin表達(dá)及分布情況;
　　3．60uMol/L濃度的DHA分別作用MGC-803細(xì)胞0.5h、1h、3h、6h, Western Blotting技術(shù)檢測細(xì)胞GSK-3β、β-catenin、P-GSK-3β蛋白表達(dá)情況，另外選用GSK-3β活性抑制劑Licl處理后，用60uMol/L濃度的DHA處理MGC-803細(xì)胞24h，觀察細(xì)胞中β-catenin蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.MTT法測定結(jié)果顯示:DHA濃

3、度由1uMol/L增加到100uMol/L MGC-803細(xì)胞的生長抑制率由8％提升到64.25%，呈濃度-效應(yīng)依賴關(guān)系，并計(jì)算出 DHA抑制MGC-803細(xì)胞增殖的IC50值在60uMol/L。各濃度組與對(duì)照組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, P<0.05。
　　2.免疫細(xì)胞化學(xué)檢測結(jié)果顯示:經(jīng) DHA處理 MGC-803胃癌細(xì)胞后,β-catenin蛋白主要分布于胞膜和胞質(zhì)，β-catenin蛋白總量減少了22.43±0.66%，P<

4、0.05，各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.Western Blotting結(jié)果顯示:60uMol/L DHA分1/2,1,3,6h時(shí)間段處理MGC-803細(xì)胞后，β-catenin蛋白總量逐漸減少; GSK-3β蛋白總量逐漸增多，P-GSK-3β蛋白總量逐漸減少。經(jīng) Licl處理后DHA作用24h組MGC-803細(xì)胞β-catenin蛋白總量較對(duì)照組減少32.19±2.32%，單用DHA處理24h組β-Catenin表達(dá)較對(duì)照