蛛網膜下腔注射Plv-UbC-HPPE-HEK293細胞對骨癌痛大鼠行為學以及脊髓背角GLAST的影響.pdf

1、研究背景：
　　 骨癌痛是一種機制獨特而復雜的慢性疼痛，局部腫瘤骨組織的各種變化誘導了神經系統(tǒng)的外周敏化和中樞敏化。研究發(fā)現(xiàn)在骨癌痛大鼠的脊髓背角出現(xiàn)特有的大量肥大的星形膠質細胞[1]。興奮性氨基酸轉運體是維持突觸間隙谷氨酸濃度的主要調節(jié)器，在已知的5種EAATs亞型中，表達于膠質細胞的GLAST(EAAT1)在清除谷氨酸過程中的作用很大[2]。疼痛與脊髓膠質細胞功能改變和GLAST表達密切相關。腦啡肽作為一種內源性阿片肽類鎮(zhèn)痛

2、物質日益受到關注，許多動物實驗已表明其有明顯的鎮(zhèn)痛效應[3]。轉基因細胞移植鎮(zhèn)痛為疼痛治療帶來新的方向，本實驗小組前期利用慢病毒載體包裝入前腦啡肽原基因(Human preproenkephalin gene,HPPE)，成功篩選出能穩(wěn)定表達的細胞株(Plv-UbC-HPPE/HEK293)，以及其對照細胞株(UbC-GFP-LV/HEK293)，現(xiàn)將其注射到骨癌模型大鼠的蛛網膜下腔，觀察其對大鼠骨癌痛行為學和脊髓背角GLAST/EAA

3、T1的表達影響。
　　 目的：
　　 觀察蛛網膜下腔注射Plv-UbC-HPPE/HEK293細胞對骨癌痛大鼠行為學以及脊髓背角谷氨酸轉運體蛋白(GLAST/EAAT1)表達的影響。
　　 方法：
　　 60只健康雌性SD大鼠，隨機分為4組(n=15)，假骨癌空白對照組(A)、骨癌模型組(B)、骨癌模型鞘內注射UbC-GFP-LV/HEK293對照組(C)、骨癌模型鞘內注射Plv-UbC-HPPE/HEK

4、293細胞治療組(D)。造模術前1d，術后1、5、10、15、20、21、23、25d測定各組大鼠后肢縮足潛伏期(Pawwithdrawallatency,PWL)。C組和D組分別于造模術后第20d蛛網膜下腔注射UbC-GFP-LV/HEK293細胞和Plv-UbC-HPPE/HEK293細胞。造模術后25d取各組大鼠L4～L6脊髓，以免疫組化方法檢測脊髓背角GLAST的表達。
　　 結果：
　　 B、C組大鼠與對照組(

5、A)相比，大鼠PWL逐漸降低（P＜0.05），GLAST表達降低(P＜0.05)；D組大鼠鞘內注射Plv-UbC-HPPE/HEK293細胞后PWL升高（P＜0.05），GLAST蛋白表達明顯升高（P＜0.05）。
　　 結論：
　　 (1)SD大鼠脛骨注射MADB-106乳腺癌細胞株可引起行走誘發(fā)痛、自發(fā)性痛敏、熱痛覺過敏和觸誘發(fā)痛等痛行為學變化，大鼠造模側脛骨X線檢查也證明了大鼠骨癌痛模型成功建立。(2)鞘內注射質粒