流行性乙型腦炎患者腦脊液及血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其組織抑制劑-1的表達(dá).pdf

1、目的:流行性乙型腦炎(Epidemic Encephalitis B)簡(jiǎn)稱(chēng)乙腦(JapaneseEncephalitis JE)，是由乙腦病毒感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起的以腦實(shí)質(zhì)炎癥為主要病變的急性傳染病。乙腦是世界上尤其是東亞和東南亞地區(qū)最主要的流行性疾病。臨床上主要表現(xiàn)為高熱，頭痛，抽搐和意識(shí)障礙等。每年約有50000人感染乙腦，約15000人因此死亡。乙腦發(fā)病率高且無(wú)特異性的治療方案，但目前人們對(duì)乙腦確切的發(fā)病機(jī)制知之甚少。有研究表明，

2、乙腦病毒感染會(huì)損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元，使血腦屏障的保護(hù)作用遭到破壞，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)。乙腦病毒感染使腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞激活，引起免疫相關(guān)性蛋白如補(bǔ)體因子、趨化因子(MCP-1，MIP-1α，MIP-1β，RANTES)、細(xì)胞因子(IL-1，IL-6，IL-18，TNF-α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、淋巴毒素、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）表達(dá)增加，這些都會(huì)破壞血腦屏障的完整性。其中MMPs參與細(xì)胞外基質(zhì)的重組，MMPs及其組織

3、抑制劑(TIMPs)的失衡參與多種疾病的發(fā)病過(guò)程，但在乙腦患者中的研究較少，本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)測(cè)量乙腦患者血清及腦脊液中MMP-9及TIMP-1的含量，探討其在乙腦發(fā)病機(jī)制中的意義及對(duì)病情監(jiān)測(cè)和預(yù)后的評(píng)估價(jià)值，為乙腦的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法:選取2013年8月～2013年11月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的24例流行性乙型腦炎患者作為病例組，該組患者均經(jīng)河北省疾控中心檢測(cè)血清乙腦IgM抗體陽(yáng)性。選取經(jīng)臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查除

4、外中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的病人10例，留取腦脊液作為腦脊液病例對(duì)照組，因人文條例規(guī)定健康人不能行腰椎穿刺術(shù)，故未設(shè)立腦脊液健康對(duì)照組。選取血清乙腦IgM抗體陰性的患者10例，留取血清作為血清病例對(duì)照組，健康人10例，留取血清作為血清健康對(duì)照組。同時(shí)根據(jù)臨床表現(xiàn)將病例組分為普通型和重型兩組。病例組與對(duì)照組患者均行腰椎穿刺術(shù)，留取腦脊液行常規(guī)、生化檢測(cè)。應(yīng)用ELISA法測(cè)量各組患者血清及腦脊液中MMP-9及TIMP-1的含量。
　　結(jié)

5、果:
　　1.臨床資料
　　流行性乙型腦炎患者可表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、抽搐、意識(shí)障礙、肌張力障礙和腦膜刺激征陽(yáng)性。24例患者均有不同程度的發(fā)熱(100％)及意識(shí)障礙(100％)，12例患者出現(xiàn)頭痛(50％)，8例患者出現(xiàn)抽搐(33.33％)，13例患者出現(xiàn)肌張力障礙(54.17％)，21例患者腦膜刺激征陽(yáng)性(87.5％)。腦脊液病例對(duì)照組為除外中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的病人10例，血清病例對(duì)照組為血清乙腦IgM抗體陰性的患者10例

6、，血清健康對(duì)照組10例。
　　2.腦脊液常規(guī)、生化結(jié)果乙腦組與對(duì)照組相比，病例組的腰穿壓力、腦脊液白細(xì)胞數(shù)、蛋白含量較對(duì)照組均升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。葡萄糖、氯化物含量與對(duì)照組比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。病例組恢復(fù)期與急性期相比，腦脊液白細(xì)胞數(shù)、蛋白含量均有所降低，腦脊液葡萄糖含量升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而腰穿壓力、氯化物含量?jī)山M比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.腦脊

7、液及血清中MMP-9的含量腦脊液中MMP-9的含量:病例組急性期腦脊液中MMP-9的含量測(cè)定值為9.3～72.9ng/ml，平均值為37.06±3.83ng/ml，病例對(duì)照組腦脊液中MMP-9的含量測(cè)定值為5.3～34.3ng/ml，平均值為17.73±3.67ng/ml，經(jīng)比較病例組患者急性期腦脊液中MMP-9的含量高于對(duì)照組患者腦脊液中MMP-9的含量，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。選取病例組患者10例，在恢復(fù)期行腰椎穿刺術(shù)，

8、檢測(cè)腦脊液中MMP-9的含量?；颊呋謴?fù)期腦脊液中MMP-9的含量測(cè)定值為4.7～92.2ng/ml，平均值為44.99±9.20ng/ml，與急性期腦脊液中MMP-9的含量相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。按照臨床表現(xiàn)將病例組分為普通型和重型兩組，其中普通型9例，重型15例。普通型組患者有1份標(biāo)本結(jié)果未測(cè)出，其余8例患者腦脊液中MMP-9的濃度為9.3～58.1ng/ml，平均濃度值為31.56±6.83ng/ml，重型組患者腦脊液

9、中MMP-9的濃度為9.8～72.9ng/ml，平均濃度值為39.99±4.60ng/ml，經(jīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　血清中MMP-9的含量:病例組血清中MMP-9的含量測(cè)定值為200.7～939.9ng/ml，平均值為591.77±41.91 ng/ml，病例對(duì)照組血清中MMP-9的含量測(cè)定值為311～558.7ng/ml，平均值為424.61±32.33ng/ml，健康對(duì)照組血清中MMP-9的含量測(cè)定值為1

10、12.7～499.6ng/ml，平均值為331.64±41.92ng/ml。各組間經(jīng)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。其中病例組患者血清中MMP-9的含量高于病例對(duì)照組和健康對(duì)照組，但病例對(duì)照組和健康對(duì)照組之間進(jìn)行比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。按照臨床表現(xiàn)將病例組分為普通型和重型兩組，普通型組患者血清中MMP-9的濃度為392.8～912.7ng/ml，平均濃度值為678.97±57.10ng/ml。重型組患者腦脊液中MM

11、P-9的濃度為200.7～939.9ng/ml，平均濃度值為539.45±54.57ng/ml。兩組間經(jīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4.腦脊液及血清中TIMP-1的含量腦脊液中TIMP-1的含量:病例組腦脊液中有2例TIMP-1的結(jié)果未測(cè)出，其余22例患者腦脊液中TIMP-1的含量測(cè)定值為42.95～124.23ng/ml，平均值為71.00±4.58ng/ml，病例對(duì)照組腦脊液中TIMP-1的含量測(cè)定值為3.52

12、～28.85ng/ml，平均值為15.22±2.89ng/ml。經(jīng)比較病例組患者腦脊液中TIMP-1的含量高于對(duì)照組患者腦脊液中TIMP-1的含量，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。普通型組患者腦脊液中TIMP-1的濃度為47.36～76.87ng/ml，平均濃度值為60.03±3.19ng/ml。重型組患者腦脊液中有2例TIMP-1的結(jié)果未測(cè)出，其余13例患者腦脊液中TIMP-1的濃度為42.95～194.85ng/ml，平均濃度值

13、為78.60±6.76ng/ml。經(jīng)比較兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。病例組患者恢復(fù)期腦脊液中TIMP-1的含量測(cè)定值為26.87～103.74ng/ml，平均值為48.44±7.58ng/ml，低于病例組急性期腦脊液中TIMP-1的含量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　血清中TIMP-1的含量:病例組血清中TIMP-1的含量測(cè)定值為33.92～68.5ng/ml，平均值為55.41±1.79ng/ml，病例對(duì)

14、照組血清中TIMP-1的含量測(cè)定值為43.17～68.72ng/ml，平均值為56.19±2.76ng/ml。健康對(duì)照組血清中TIMP-1的含量測(cè)定值為39.65～114.1ng/ml，平均值為54.73±6.82ng/ml。各組間經(jīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。普通型組患者血清中TIMP-1的濃度為44.71～64.76ng/ml，平均濃度值為54.58±2.11ng/ml。重型組患者血清中TIMP-1的濃度為33.92～68

15、.5ng/ml，平均濃度值為55.90±2.62ng/ml。兩組間經(jīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　5.腦脊液和血清中各指標(biāo)含量的關(guān)系應(yīng)用SPSS軟件對(duì)腦脊液和血清中各指標(biāo)的含量進(jìn)行分析，結(jié)果表明，腦脊液中MMP-9的含量與TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性(r=0.272，P=0.232)，血清中MMP-9的含量與TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性(r=-0.06，P=0.782)，腦脊液中MMP-9的含量與血清中MMP-9的含

16、量沒(méi)有相關(guān)性（r=-0.129，P=0.559），腦脊液中TIMP-1的含量與血清中TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性（r=-0.037，P=0.87），血清中MMP-9的含量與血清中乙腦特異性IgM抗體的濃度沒(méi)有相關(guān)性(r=0.034，P=0.875)，血清中TIMP-1的含量與血清中乙腦特異性IgM抗體的濃度沒(méi)有相關(guān)性(r=0.112，P=0.604)。
　　6.腦脊液中各指標(biāo)的含量與血腦屏障破壞程度的關(guān)系用腦脊液中蛋白含量(mg/

17、l)與血清中白蛋白含量(g/l)的比值作為血腦屏障破壞的一個(gè)指標(biāo)判斷血腦屏障的破壞程度。結(jié)果表明，腦脊液中MMP-9的含量與血腦屏障的破壞無(wú)相關(guān)性(r=0.134，P=0.553)，腦脊液中TIMP-1的含量與血腦屏障的破壞亦無(wú)相關(guān)性（r=0.200，P=0.385）。
　　結(jié)論:
　　1.病例組急性期腦脊液中MMP-9的含量明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;病例組急性期血清中MMP-9的含量與病例對(duì)照組和健康對(duì)照組比較，

18、差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，病例組患者急性期血清中MMP-9的含量高于病例對(duì)照組和健康對(duì)照組，但病例對(duì)照組與健康對(duì)照組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，按病程將病例組患者分為急性期和恢復(fù)期，兩組比較腦脊液中MMP-9的含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。按病情將病例組患者分為普通型和重型兩組，腦脊液及血清中MMP-9兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.病例組患者急性期腦脊液中TIMP-1的含量明顯高于對(duì)照組患者腦脊液中TIMP-1的含量，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;

19、重型患者腦脊液中TIMP-1的含量高于輕型患者腦脊液中TIMP-1的含量，表明腦脊液中TIMP-1的含量對(duì)于監(jiān)測(cè)患者病情輕重具有重要價(jià)值;患者恢復(fù)期腦脊液中TIMP-1的含量低于急性期腦脊液中TIMP-1的含量，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，動(dòng)態(tài)觀(guān)察患者腦脊液中TIMP-1的含量對(duì)乙腦患者病情變化及預(yù)后評(píng)估具有重要意義。病例組患者急性期血清中TIMP-1的含量與病例對(duì)照組和健康對(duì)照組比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。普通型與重型患者相比，血清中TIMP-1的

20、含量亦無(wú)明顯差異。
　　3.腦脊液中MMP-9的含量與TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性，血清中MMP-9的含量與TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性，腦脊液中MMP-9的含量與血清中MMP-9的含量沒(méi)有相關(guān)性，腦脊液中TIMP-1的含量與血清中TIMP-1的含量沒(méi)有相關(guān)性，血清中MMP-9的含量與血清中乙腦特異性IgM抗體的濃度沒(méi)有相關(guān)性，血清中TIMP-1的含量與血清中乙腦特異性IgM抗體的濃度沒(méi)有相關(guān)性，需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。