雙酚A對(duì)小鼠肝臟和脾臟以及小腸毒性作用的研究.pdf

1、為探討雙酚A對(duì)小鼠肝臟、脾臟和小腸的毒性作用，本試驗(yàn)選取100只30g左右雌性、昆明小白鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物，采用血液生化檢測(cè)技術(shù)、組織化學(xué)染色技術(shù)、免疫組織化學(xué)方法和圖像分析技術(shù)等觀察了各組小鼠肝臟、脾臟和小腸黏膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并對(duì)肝臟中細(xì)胞凋亡相關(guān)因子Bax、Bcl-2的表達(dá)和脾臟中CD4<'+>、CD8<'+>T細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行了定量觀察；同時(shí)，還觀察了腸道的堿性磷酸酶(AKP)活性及杯狀細(xì)胞的數(shù)量和分布的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果如下： 1.

2、血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明，雙酚A染毒后小鼠血清中四種肝功能酶均發(fā)生了一定的變化，其中，高、中劑量組小鼠血清中ALT、AST的含量先升高后降低，2h和4h明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，24h降為最小值。雙酚A低劑量組各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組差異均不顯著(P>0.05)。在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，TP、ALB的變化不明顯(P>0.05)。 2.組織病理學(xué)觀察結(jié)果顯示，隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)，高劑量試驗(yàn)組小鼠肝臟中出現(xiàn)大量肝細(xì)胞變性、壞死，匯管區(qū)血管周

3、圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。Bcl-2和Bax免疫組化染色結(jié)果顯示，雙酚A高、中劑量組小鼠肝細(xì)胞中Bcl-2陽(yáng)性物質(zhì)的表達(dá)量明顯低于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)，低劑量組在36h和72h與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)，其他時(shí)刻差異不顯著。高、中劑量組小鼠肝細(xì)胞中Bax陽(yáng)性物質(zhì)的表達(dá)量在2～36h明顯高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)，低劑量組在2h和24h與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。 3.對(duì)脾臟中CD4<'+>和CD8

4、<'+>T細(xì)胞免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果顯示，各雙酚A試驗(yàn)組小鼠脾臟中CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞數(shù)量明顯高于對(duì)照組，CD4/CD8比值明顯降低，陽(yáng)性細(xì)胞的量呈明顯的雙酚A劑量依賴性，表現(xiàn)為高劑量>中劑量>低劑量試驗(yàn)組，且CD8<'+>T細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)強(qiáng)度較CD4<'+>T細(xì)胞明顯。 4.采用H.E.、PAS和Gomori染色對(duì)雙酚A對(duì)試驗(yàn)鼠小腸結(jié)構(gòu)的影響的觀察結(jié)果顯示，各試驗(yàn)組小鼠腸黏膜均有明顯水腫，并伴有黏膜上皮細(xì)胞變性、脫

5、落。與對(duì)照組相比，不同取材時(shí)間，各試驗(yàn)組小鼠的十二指腸絨毛長(zhǎng)度明顯降低，腸黏膜上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞(GC)的數(shù)量以及腸黏膜中AKP活性也顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。 述結(jié)果表明，不同劑量的雙酚A對(duì)小鼠肝臟、脾臟和小腸有不同程度的損傷，且損傷程度與雙酚A的染毒劑量呈正相關(guān)。同時(shí)，對(duì)肝臟中的凋亡相關(guān)因子Bcl-2和Bax也有顯著的影響，可促進(jìn)促凋亡因子Bax的表達(dá)，而誘發(fā)肝細(xì)胞凋亡。此外，雙酚A可改變CD4<'+>/CD8<'+>T細(xì)