雙酚A遺傳毒性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:雙酚A(bisphenol A, BPA),是一種廣泛使用的化工原料,添加BPA可使塑料制品具有輕巧耐用、無色透明以及加強(qiáng)抗沖擊性等特點(diǎn),并有效防止水果和蔬菜從內(nèi)部侵蝕金屬容器,所以BPA成為制造聚碳酸酯、環(huán)氧樹脂、食品包裝、牙科填充劑、食品罐頭涂料和醫(yī)療器械等產(chǎn)品的重要原料。BPA具有毒作用劑量小、潛伏時(shí)間長等特點(diǎn),對健康造成多種潛在危害,國內(nèi)外許多學(xué)者對BPA的毒性作用進(jìn)行了研究報(bào)道。目前對BPA的毒性研究多集中在內(nèi)分泌系統(tǒng)、

2、生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等方面,其遺傳毒性還有待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)通過體外染毒檢測BPA對中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)的細(xì)胞存活率、DNA的直接損傷作用、微核率以及染色體畸變率,并通過Ames試驗(yàn)檢測BPA的致突變性,通過將上述檢測不同遺傳學(xué)終點(diǎn)的試驗(yàn)相結(jié)合探討B(tài)PA的遺傳毒性。
  方法:(1)以倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),選用四甲基偶氮唑鹽法(即MTT比色法)檢測不同濃度雙酚A對CHO細(xì)胞作用不同時(shí)間后,對細(xì)胞存活率的

3、影響;(2)采用單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)(即SCGE彗星試驗(yàn)),了解不同濃度及不同作用時(shí)間下雙酚A對CHO細(xì)胞DNA單鏈斷裂的損傷程度;(3)采用微核試驗(yàn)研究不同濃度雙酚A對CHO細(xì)胞微核率的影響;(4)采用染色體畸變分析檢測不同濃度雙酚A對CHO細(xì)胞染色體畸變率及誘導(dǎo)的主要畸變類型;(5)通過Ames試驗(yàn)了解不同濃度雙酚A的致突變效應(yīng)。
  結(jié)果:(1)MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示,分別經(jīng)12h及24h染毒處理后,當(dāng)雙酚A終濃度為40μmol/

4、L時(shí),CHO細(xì)胞的存活率顯著高于陰性對照組。當(dāng)濃度高于80μmol/L時(shí),細(xì)胞存活率呈現(xiàn)下降趨勢,各染毒組吸光度值與陰性對照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)12h及24h處理后,雙酚A濃度高于80μmol/L時(shí),可引起CHO細(xì)胞的拖尾率、尾部DNA百分含量及尾長增加。(3)微核試驗(yàn)和染色體畸變試驗(yàn)表明,在雙酚A處理24h后,當(dāng)濃度高于100μmol/L時(shí), CHO細(xì)胞的微核率和染色體畸變率顯著增加。其中染色體

5、畸變的類型以斷裂、無著絲粒斷片和裂隙為主。(4)Ames試驗(yàn)檢測的BPA染毒濃度為10μg/皿~5mg/皿共九個(gè)劑量組,其結(jié)果為陰性。在活化和非活化條件下,與陰性對照組比較,可見部分菌株的回變菌落數(shù)有所增加,但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
  結(jié)論:(1)外培養(yǎng)條件下,雙酚A在染毒濃度為40μmol/L作用12h后,可顯著刺激細(xì)胞的生長,表現(xiàn)出一定的刺激效應(yīng)。從80μmol/L開始,染毒12h對CHO細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,表現(xiàn)出細(xì)胞毒性

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