常溫氧合血灌注保豬供心的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分常溫氧合血灌注保存豬供心模型建立
　　目的:本實(shí)驗(yàn)旨在初步建立供心氧合血灌注保存的動(dòng)物模型，把握實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵細(xì)節(jié)，借此初步評(píng)估此種保存方式與傳統(tǒng)冷藏保存相比是否具有優(yōu)越性。
　　方法:雄性中華小型豬6頭，體重30±3Kg，隨機(jī)分為兩組:灌注保存組（MP組），4頭，4℃ST.Thomas液灌停獲取心臟，常溫氧合血連續(xù)灌注保存8h。監(jiān)護(hù)儀監(jiān)測(cè)心率，CDI500連續(xù)動(dòng)脈血?dú)夥治鰞x監(jiān)測(cè)保存期間溫度、pH值、PO2、PCO2、Na

2、+濃度、K+濃度、Ca2+濃度，各時(shí)間點(diǎn)抽取動(dòng)脈血監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血?dú)狻㈦S機(jī)血糖、ACT。冷藏保存組（CS組），2頭，4℃Celsior液灌停獲取心臟，浸泡在裝有4℃Celsior液的無菌袋中冷藏保存8h。兩組8h后分別取左室心肌組織進(jìn)行光鏡觀察，取左室心內(nèi)膜組織進(jìn)行電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察。
　　結(jié)果:
　　1 MP組保存的心臟均實(shí)現(xiàn)自主節(jié)律復(fù)跳，跳動(dòng)保存8h。
　　2光鏡下觀察，氧合血灌注保存組心肌肌纖維更加整齊，間質(zhì)無明顯腫脹

3、。
　　3電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察，氧合血灌注保存組肌纖維排列整齊，結(jié)構(gòu)整齊清晰，線粒體嵴清晰，Celsior液冷藏保存組線粒體嵴融合，有空泡樣改變，線粒體有增多聚集。
　　結(jié)論:供心常溫氧合血灌注保存8h是完全可行的，動(dòng)物模型成功建立，此種保存方法可以延長供心保存時(shí)限。
　　第二部分供心灌注保存與Celsior液冷藏保存心肌超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡的研究
　　目的:常溫氧合血灌注保存8h與Celsior液冷藏保存8h心臟超微

4、結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡研究對(duì)比，驗(yàn)證氧合血連續(xù)灌注心臟保存與冷藏保存相比是否具有優(yōu)越性。
　　方法:12頭中華小型豬隨機(jī)分為兩組:灌注保存組(MP組)，6頭，常溫氧合血連續(xù)灌注保存8h;冷藏保存組（CS組），6頭，浸泡在裝有Celsior液的無菌袋中4℃冷藏保存8h。分別取左室心肌組織進(jìn)行光鏡觀察，并制作蠟塊，切取白片TUNEL法進(jìn)行原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)，取左室心內(nèi)膜組織進(jìn)行電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察。
　　結(jié)果:電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察，Celsio