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1、目的:通過研究Notch信號(hào)通路中DLL3、DLL4配體在先天性巨結(jié)腸患兒結(jié)直腸組織中的表達(dá)規(guī)律,探討DLL3、DLL4在先天性巨結(jié)腸結(jié)直腸組織的表達(dá)及其意義。
方法:取15例先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung′s discase HD)患兒的結(jié)直腸組織,分別分為狹窄段、移行段、正常段腸管。應(yīng)用蛋白印跡法與實(shí)時(shí)定量熒光PCR的方法,分別檢測(cè)DLL3、DLL4基因在先天性巨結(jié)腸患兒結(jié)直腸組織中的表達(dá),并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行定量分析。
2、
結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示DLL3和DLL4蛋白在狹窄段組腸管相對(duì)表達(dá)量分別為0.26±0.03、0.35±0.04,顯著低于移行段組1.10±0.02、1.20±0.04(p<0.05)和正常段組腸管1.33±0.05、1.42±0.02(p<0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示DLL3和DLL4在先天性巨結(jié)腸結(jié)直腸組織狹窄段組中的mRNA的轉(zhuǎn)錄水平分別為0.21±0.05、0.33±0.04,顯著低于移行段0.9
3、5±0.02、1.03±0.04(p<0.05)與正常段組的相應(yīng)表達(dá)水平1.13±0.05、1.06±0.02(p<0.05)。DLL3及DLL4在HD患兒結(jié)直腸組織中mRNA表達(dá)水平與蛋白表達(dá)一致。
結(jié)論:DLL3與DLL4在先天性巨結(jié)腸患兒的狹窄段組織中的蛋白和mRNA水平表達(dá)均明顯降低,DLL3及DLL4的表達(dá)減少可能與HD的發(fā)生有關(guān)。Notch信號(hào)通路中的Delta-like類配體可能在先天性巨結(jié)腸的發(fā)病機(jī)制中起發(fā)揮著
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