微管相關(guān)蛋白-2在先天性巨結(jié)腸癥腸壁的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法,觀察實驗組先天性巨結(jié)腸癥(Hirschsprung's disease,HD)患兒擴(kuò)張段(有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段)和痙攣段(無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段)腸壁神經(jīng)叢中微管相關(guān)蛋白-2(Microtubule Associated Protein-2,MAP-2)的表達(dá)結(jié)果,同時設(shè)立對照組。并對比觀察神經(jīng)元特異性烯醇化酶(Neurone specific enolase,NSE)、S-100蛋白(Soluble protein1

2、00,S-100)兩種神經(jīng)標(biāo)志物在實驗組巨結(jié)腸腸壁及對照組表達(dá)的情況,旨在于進(jìn)一步探討先天性巨結(jié)腸癥的發(fā)病機(jī)制與腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系,以期找出診斷先天性巨結(jié)腸癥簡便有效的方法。
　　 方法:
　　 1.標(biāo)本取自蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院小兒外科2007-2009年經(jīng)臨床確診的HD患兒手術(shù)切除的腸組織30例,包括擴(kuò)張段與痙攣段,作為實驗組。并選取15例年齡與之相近的無HD及其它腸壁神經(jīng)發(fā)育異常疾病患兒的手術(shù)切除結(jié)腸標(biāo)本作為對照組

3、。
　　 2.對實驗組HD痙攣段、擴(kuò)張段和對照組腸壁組織進(jìn)行切片行HE染色和MAP-2、NSE、S-100蛋白的免疫組織化學(xué)染色,并定性、定位及定量分析,定量分析采用圖像分析軟件(Image-Pro-Plus)分別判定各指標(biāo)在HD擴(kuò)張段與痙攣段神經(jīng)叢中陽性染色面積百分比,所得數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.HE染色結(jié)果示實驗組HD擴(kuò)張段和對照組腸壁肌間神經(jīng)叢及粘膜下神經(jīng)叢

4、中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞皆存在,大小不等；HD的痙攣段未見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,且各層中神經(jīng)纖維均有不同程度的排列改變。
　　 2.微管相關(guān)蛋白-2免疫組化染色可見其在HD擴(kuò)張段及對照組結(jié)腸的肌間及粘膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿內(nèi)呈強(qiáng)陽性表達(dá),對神經(jīng)纖維呈弱陽性或陰性表達(dá)；而HD痙攣段腸壁肌間神經(jīng)叢及粘膜下神經(jīng)叢中微管相關(guān)蛋白-2的免疫組化染色則未見陽性表達(dá)的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,神經(jīng)纖維大多呈陰性表達(dá),少數(shù)呈弱陽性表達(dá)。NSE對HD擴(kuò)張段及對照組腸壁肌間、粘膜

5、下神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈強(qiáng)陽性表達(dá),神經(jīng)纖維呈陽性表達(dá)；在HD痙攣段腸壁可見NSE陽性表達(dá)的神經(jīng)纖維；S-100蛋白在HD擴(kuò)張段及對照組腸壁肌間、粘膜下神經(jīng)叢中均不表達(dá)于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞周圍成分施萬細(xì)胞及周圍細(xì)胞中呈強(qiáng)陽性表達(dá),在HD痙攣段可見神經(jīng)纖維及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對S-100呈強(qiáng)陽性反應(yīng),且陽性表達(dá)的神經(jīng)纖維均明顯增生,形態(tài)扭曲。
　　 3.定量分析:MAP-2、NSE、S-100在HD擴(kuò)張段及痙攣段神經(jīng)叢中平均陽性染色

6、面積百分率均數(shù)分別為0.26、0.12；0.32、0.22；0.25、0.39,經(jīng)統(tǒng)計軟件分析各指標(biāo)在HD擴(kuò)張段及痙攣段中的差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.微管相關(guān)蛋白-2對神經(jīng)節(jié)細(xì)胞染色特異性高,對神經(jīng)纖維呈弱陽性或陰性表達(dá),在病理論斷上較NSE、S-100蛋白能更好地顯示神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。
　　 2.微管相關(guān)蛋白-2免疫組化染色可很好地顯示正常結(jié)腸及HD擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,而在H