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1、V i s u d y n e 光動力療法預(yù)防晶狀體后囊膜混濁的實(shí)驗(yàn)研究T h e E f f e c t o fP h o t o d y n a m i cT h e r a p yw i t hV i s u d y n eo n t h e P r e v e n t i o no fP o s t e r i o rC a p s u l e0 p a c i f i c a t i o n復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院博士研究生
2、: 黎蕾專 業(yè): 眼科學(xué)導(dǎo) 師: 王文吉教授導(dǎo)師組成員: 陸國生教授錢江教授\V i s u d y n e 光動力療法預(yù)防晶狀體后囊膜混濁的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的 觀察V i s u d y n e 光動力療法( P D n 對離體培養(yǎng)的兔品狀體上皮細(xì)胞( R L E C s ) 和人晶狀體上皮細(xì)胞系( H L E C s ) 的殺傷作川.確定殺傷L E C s 的最佳P D T 參數(shù),探討P D T 在體外殺傷L E C s 的作用機(jī)理.
3、評價(jià)P D T 在兔眼術(shù)中麻月j 抑制后囊膜餛濁( P C O ) 的有效性和安全性。方法 ( 一) R L E C s 原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),H L E C s 系傳代培養(yǎng).透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。M T T 法測定單純激光、不同濃度光敏劑和P D T 對R L E C s 和H L E C s 的殺傷怍用,井篩選最佳P D T 參數(shù)。( 二) 流式細(xì)胞儀P I 染色法分析P D T 對H L E C s 細(xì)胞周期的影響,A n n
4、e x i nV - F I T C /P I 雙染法榆測細(xì)胞凋亡率,透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化。( 三) 兔眼晶狀體超聲乳化摘除后囊袋內(nèi)注入含有V i s u d y n e 的透明質(zhì)酸鈉.并行激光照射。術(shù)后6 周和1 2 周對P C O 評估通過臨床觀察( 分別對纖維化型P C O 和再生型P C O 進(jìn)鉬升級) ,照相、光鏡組織學(xué)檢查,同時(shí)測量中央后囊膜厚度,電鏡觀察捕膜和虹膜超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果 ( - - ) 在體外成功培養(yǎng)兔R
5、L E c s 。M T T 檢測結(jié)果顯示:單純激光對R L E c s和H L E C s ) ] 己殺傷作用。單純光敏劑組:V i s u d y n e 濃度( o1 2 5 p g /m l ,對細(xì)胞沒有殺傷作用,,01 2 5 9 9 /m 1 .殺傷率呈濃度依賴性,P D T 組細(xì)胞殺傷:# 呈定的濃度依賴性。( 二) V i s u d y n e 光動力療法作川十H L E C s 后,細(xì)胞閣期分析顯示G 2 期細(xì)胞數(shù)增
6、多,而S 期細(xì)胞數(shù)減少。P D T 后1 2 h 、2 4 h { 4 1 4 8 h 細(xì)胞凋亡率分別為7 71 7 i 25 5 %、9 31 3 ±I 1 4 %{ 1 1 9 74 7 ::09 0 %??圩倦婄R觀察見:激光光斑未照射部位為J I 二常H I ,E C s ,激光光斑照射部位細(xì)胞呈捌亡表現(xiàn)。( i ) 術(shù)后6 周和1 2 N .P D T 治療組和對照組比較:P C O 櫸度明硅輕.術(shù)后6 N :纖維化掣
7、P c o 和再生型P C O 分級兩組之間有統(tǒng)汁學(xué)輥著性差異( P < 0 0 0 ¨,術(shù)后1 2 N :阿紐之問比較:纖維化! 口p c o 分級有統(tǒng)¨學(xué)硅蔣性差異( P - - 0 0 3 0 6 ) .再,E 型P C O 分級無統(tǒng)¨學(xué)娃并性節(jié)異( P - 01 8 8 8 ) 。S o e m m e r i n g f l , 彤成情I 兌P D T 治療紐l ?^ 較對照組輕。P D T
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