人工I型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實驗研究.pdf

1、第一部分、人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的動物模型的制作
　　目的:建立一個S-D大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾傷后神經(jīng)外膜損傷和神經(jīng)纖維部分損傷，之后用人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的模型。損傷分類屬于輕度SeddonⅢ型或SunderlandⅢ-Ⅴ度損傷。
　　方法:48只健康成年雄性S-D大鼠按照隨機表法隨機分為2組，每組24只，各組編號:Ⅰ組，Ⅱ組。Ⅰ組為實驗組（瘢痕切除神經(jīng)松解后切除神經(jīng)外膜，人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜

2、）、Ⅱ組為對照組（瘢痕切除神經(jīng)松解后切除神經(jīng)外膜，周圍軟組織進行覆蓋）。損傷后大體觀察。測定坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)。松解前6周測定肌肉動作電位(MAP)的出現(xiàn)率和出現(xiàn)MAP的運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)。
　　結(jié)果:
　　①大體觀察:大鼠均健康存活，無手術(shù)切口感染。兩組大鼠患肢均在傷后麻醉蘇醒后檢測顯示立刻癱瘓，后支呈瘸腿狀行走，術(shù)后12天時患側(cè)足踝關(guān)節(jié)處出現(xiàn)破潰。
　?、赟FI值為0表示坐骨神經(jīng)功能正常，值為-1

3、00表示坐骨神經(jīng)完全斷裂。所有動物損傷前SFI值均接近0，提示功能正常。Ⅰ組:一周末時，SFI:-86.23±6.65，三周末時SFI.:-39.62±5.27，六周末時SFI:-30.48±6.49。Ⅱ組:SFI:-85.26±7.27，三周末時SFI:-41.63±5.11，六周末時SFI:-29.42±2.34。組間對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，說明兩組損傷程度相近。
　　③傷后6周（松解術(shù)中行松解前）肌肉動作電位(

4、MAP)的出現(xiàn)率的測定:Ⅰ組:6周時7只大鼠出現(xiàn)動作電位，17只未出現(xiàn)動作電位，出現(xiàn)率29.2％;Ⅱ組:6周時6只大鼠出現(xiàn)動作電位，18只未出現(xiàn)動作電位，出現(xiàn)率25.0％。兩組在損傷6周時MAP出現(xiàn)率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=0.26，P＞0.05)。傷后6周（松解術(shù)中行松解前）出現(xiàn)動作電位的例數(shù)測定運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度:Ⅰ組38.79±6.18m/s;Ⅱ組:39.42±5.28m/s。6周時MNCV差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

5、>　　④組織學(xué)觀察:Ⅰ組和Ⅱ組光鏡下觀察損傷相近，均可見神經(jīng)外膜破損，外膜和束膜下出血水腫。部分毛細血管破裂出血。神經(jīng)纖維部分撕裂，之間形成間隙，纖維排列不整齊，部分髓鞘染色變淺。
　　結(jié)論:S-D大鼠坐骨神經(jīng)外膜鉗夾損傷的模型在神經(jīng)松解前兩組的損傷程度相近?？梢耘懦山庑g(shù)前因為各種偏倚產(chǎn)生的誤差。
　　第二部分、人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實驗研究
　　目的:觀察人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建損傷段神經(jīng)外膜后神經(jīng)的病

6、理學(xué)變化及功能影響，探討人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實驗效果，評定其對損傷段神經(jīng)外膜的形態(tài)和神經(jīng)功能恢復(fù)的作用以及神經(jīng)外膜的再生能力。
　　方法:48例S-D大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)擠壓損傷神經(jīng)外膜重建模型建立完成，右側(cè)坐骨神經(jīng)作為空白對照組不做任何處理。損傷6周后S-D大鼠全部存活，除去取材用鼠，采用第一部分的分組，此時設(shè)定為A組（實驗組）、B組（對照組），每組20只S-D大鼠，二期手術(shù)兩組均行瘢痕切除，神經(jīng)松解術(shù)。術(shù)后普通喂養(yǎng)9

7、周，分別于術(shù)后第6周記錄各組實驗S-D大鼠的MAP出現(xiàn)率(％)和MNCV(m/s)，術(shù)后6周內(nèi)每周末記錄大鼠SFI）。6周時MRI比較實驗組和對照組的坐骨神經(jīng)橫徑和前后徑;9周時觀察患肢坐骨神經(jīng)光鏡和電鏡下髓鞘形成情況和神經(jīng)生長情況;計算機圖像分析系統(tǒng)測定有髓神經(jīng)纖維和髓鞘生長情況;髓鞘堿性蛋白(MBP)實驗組和對照組的蛋白含量變化差異。之后S-D大鼠實施安樂死，檢測兩組S-D大鼠雙下肢的脛前肌濕重、肌纖維截面積的的差異，判斷肌肉萎縮程

8、度。
　　結(jié)果:實驗組（A組）神經(jīng)外膜大部分已修復(fù)，較為平整，與周圍組織無明顯粘連，神經(jīng)再生較多，直徑增粗，成熟度較高，髓鞘厚度高?；贾窠?jīng)松解前一天、松解后6周坐骨神經(jīng)MNCV均值分別為38.79±6.18m/s、55.19±3.17m/s。對照組（B組）沒有形成完整的神經(jīng)外膜，神經(jīng)纖維與周圍組織再次產(chǎn)生粘連，周圍大量膠原纖維增生，神經(jīng)再生稀疏，排列雜亂，成熟度較低，髓鞘厚度低。患肢神經(jīng)松解前一天、松解后6周坐骨神經(jīng)MNCV均值