H2S與大鼠大腦中動脈平滑肌細(xì)胞內(nèi)皮衍生超極化因子介導(dǎo)的超極化反應(yīng)的關(guān)系.pdf

1、硫化氫(hydrogen sulfide,H2S)是一種具有臭雞蛋樣氣味的有毒無色氣體。但近年來研究發(fā)現(xiàn)哺乳動物體內(nèi)能夠內(nèi)源性合成H2S,H2S被認(rèn)為是繼一氧化氮(nitric oxide,NO)和CO后的第3種內(nèi)源性氣體信號分子,并且參與調(diào)節(jié)體內(nèi)許多生理病理過程。內(nèi)皮衍生超極化因子(endothelium-derived hyperpolarizing factor,EDHF)是一種內(nèi)皮依賴性的血管舒張因子,是除NO和前列環(huán)素(pro

2、stacyclin,PGI2)外控制血管自我穩(wěn)定性的第三種舒張血管的自體活性物質(zhì)。本室近期研究表明大鼠腦基底動脈上的EDHF反應(yīng)可能為H2S所致。大腦中動脈(middle cerebral artery,MCA)是大腦一種很重要的供血血管,因此,本文就EDHF介導(dǎo)大鼠MCA平滑肌細(xì)胞靜息膜電位的超極化作用進(jìn)行了研究,探討H2S在大鼠MCA中是否具有EDHF反應(yīng)的特征。
　　目的:
　　探討大鼠MCA中EDHF介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞

3、(VSMC)的靜息電位超極化作用與H2S的關(guān)系。
　　方法:
　　1.采用細(xì)胞內(nèi)電位記錄實(shí)驗(yàn)方法,記錄大鼠離體MCA的VSMC靜息電位。
　　2.通過阻塞大鼠MCA制備局腦缺血再灌注模型。觀察腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能癥狀和腦組織的H2S含量。
　　3.先用免疫磁珠法分離獲得大鼠MCA內(nèi)皮細(xì)胞,采用RT-PCR的方法檢測有無內(nèi)源性合成硫化氫的酶-CSE的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.用NO合酶抑

4、制劑(L-NAME,3×10-5mol/L)和前列環(huán)素(PGI2)合成酶抑制劑(Indo,10-5mol/L)預(yù)處理后,10-7~10-4.5mol/LACh可使大鼠MCA的VSMC發(fā)生濃度依賴性超極化作用。鈣激活鉀通道的阻斷劑四乙胺(TEA,1×10-3mol/L)或H2S合成酶(胱硫醚-γ-裂解酶,CSE)的抑制劑PPG(10-4mol/L)均可明顯取消這種非NO、非PG2介導(dǎo)的超極化。
　　2.H2S供體NaHS(10-5~

5、10-2.5mol/L)對大鼠MCA的VSMC產(chǎn)生濃度依賴性的超極化作用,而1×10-3mol/LTEA可以抑制其超極化作用。
　　3.合成硫化氫的底物L(fēng)-Cys(10-5-10-2.5mol/L)對大鼠MCA的VSMC可產(chǎn)生濃度依賴性的超極化作用;但去除大鼠MCA內(nèi)皮幾乎可完全取消L-Cys對平滑肌細(xì)胞膜電位的超極化作用,在內(nèi)皮完整大鼠MCA上,1×10-4mol/LPPG幾乎完全取消L-Cys對該血管平滑肌細(xì)胞膜電位的超極化作