中藥牡丹皮質量控制及其有效成分的藥代動力學研究.pdf

1、本課題建立了牡丹皮中的三種主要有效成分沒食子酸、芍藥苷和丹皮酚的HPLC-DAD含量測定方法，系統(tǒng)考察了影響提取效率的提取溶劑、提取時間、提取次數(shù)等因素，最后確定超聲提取20min，線性范圍分別為4.004～100.1μg/ml；20.6～515.0μg/ml；33.28～832.0μg/ml。平均回收率分別為100.7％、99.2％、97.8％；RSD分別為1.6％、3.0％、1.1％，方法準確可靠，并應用到16批牡丹皮藥材的測定，同

2、時建立了牡丹皮藥材的指紋圖譜，共匹配出17個共有峰，并對藥材進行相似度評價，了解藥材間的質量差異，結果顯示藥材質量差異不明顯，多成分含量測定與指紋圖譜相結合的方法使得牡丹皮的質量控制更全面、可靠。隨后我們采用主成分分析和聚類分析對藥材進行了更細致的研究，在分析過程中，主成分分析和聚類分析可以相互印證，增加結果的可信度，結果顯示牡丹皮在主成分和聚類分析中都明顯被聚為四類，其中山東和河北產(chǎn)牡丹皮聚成一類，而安徽產(chǎn)牡丹皮則和浙江聚成一類，顯示

3、出一定的地域相關性，為牡丹皮質量一致性和道地性研究提供依據(jù)。 采用HPLC-TOF/MS和GC-MS對牡丹皮藥材中的成分進行定性鑒別。通過比對數(shù)據(jù)庫，在HPLC-TOF/MS研究中共鑒別出21中化合物，實驗中分別采集了牡丹皮提取物的正、負離子流圖，并對其中的兩對同分異構體進行了鑒別。在此基礎上對指紋圖譜中色譜峰進行指認，指認出17個共有峰中的14個，對牡丹皮指紋圖譜進行明晰化，為更好的評價指紋圖圖譜的代表性以及闡明牡丹皮質量差異

4、的來源提供了手段。指紋圖譜中14個共有峰絕大部分為牡丹皮中特有的芍藥苷和芍藥醇類物質，表明具有較強的代表性。對牡丹皮中揮發(fā)油成分和乙醚提取物成分采用GC-MS進行分析鑒別與定性研究，由于GC-MS聯(lián)用儀配有EI離子源，EI離子源所得質譜圖具有重現(xiàn)性高，有相應的化學成分數(shù)據(jù)庫等特點，可借助計算機檢索與質譜數(shù)據(jù)庫自動匹配進行鑒別分析，實驗中共成功鑒別出牡丹皮中32個成分，更全面的了解牡丹皮中的化學成分，為其后續(xù)質量控制提供基礎。 建

5、立HPIC-MS方法測定大鼠血漿中芍藥苷含量，芍藥苷在0.0412μg/ml～10.30μg/ml濃度范圍內呈良好的線性關系，芍藥苷低、中、高三個濃度的相對回收率均在95.0％～105％之間，日內和日間精密度相對標準差均小于6.0％；穩(wěn)定性實驗結果表明，芍藥苷在4℃貯存4天內穩(wěn)定，常溫12h穩(wěn)定性良好。在給定的方法下，血漿中芍藥苷的定量限為0.0412μg/ml，血漿中內源性物質均不干擾樣品峰，含量測定方法簡便可靠，適合于生物樣品成分的

6、含量測定。該方法成功應用于SD大鼠口服給藥芍藥苷純品，牡丹皮提取物和復方(牡丹皮和丹參)提取物后的藥代動力學研究。結果顯示口服芍藥苷純品和藥材提取物后芍藥苷在大鼠體內的藥動學行為存在顯著差異，包括AUC0-t，AUC0-8，MRT，T1/2在內的藥動學參數(shù)在口服藥材提取物之后顯著提高，表明生物利用度的提高，從藥代動力學的角度闡明了中藥的優(yōu)越性以及中藥作用的整體性，中藥質量控制必須從整體出發(fā)。從藥動學結果推測芍藥苷生物利用度的提供可能與牡