決明子的質(zhì)量控制及在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、目的：本文以決明子作為研究對象，建立用于評價決明子藥材中蒽醌含量的HPLC-DAD測定方法，并對其在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程進行研究。
　　方法：
　　1.采用Zorbax Extend-C18(250mm×4.6mm，5μm)(Palo Alto，CA，USA)色譜柱，以乙腈-0.3％乙酸水為流動相進行梯度洗脫，流速1.0 mL/min，檢測波長258nm，柱溫28℃。采用HPLC-DAD測定方法，定量分析8個具有活性的蒽

2、醌類成分的含量。
　　2.SD大鼠98只，隨機分成14組，清醒狀態(tài)下按1.0g/kg體重灌胃給予決明子總蒽醌類提取物，于0，0.0833，0.1667，0.3333，0.5，1，2，3，4，5，6，8，10，12，24 h麻醉后眼眶取血0.3ml，對血漿樣品預(yù)處理后，進行高效液相色譜測定，根據(jù)測定結(jié)果計算決明子總蒽醌3個目標(biāo)化合物(aloe-emodin，obtusifoline和chrysophanol)的藥代動力學(xué)參數(shù)。

3、>　　SD大鼠6只，給藥5只，空白1只。按1.0g/kg體重灌胃給予總蒽醌提取物，將大鼠分別放入代謝籠內(nèi)，于0～4、4～8、8～12、12～20、20～28、28～40、40～52、52～60、60～72 h時間段收集尿樣并準(zhǔn)確記錄尿樣體積，對尿樣預(yù)處理后進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。根據(jù)收集的尿液體積計算累計排泄率，繪制排泄曲線，分析決明子總蒽醌3個目標(biāo)化合物的尿排泄規(guī)律。
　　SD大鼠5只，進行腹腔手術(shù)以便實驗中收集膽汁。

4、按1.0g/kg體重灌胃給予總蒽醌提取物，于給藥后的每4h分段收集膽汁樣品并準(zhǔn)確記錄體積，且每4h給大鼠補充適量的生理鹽水和10％的烏拉坦溶液，以保證實驗大鼠的正常體液和維持大鼠的麻醉狀態(tài)。收集到的膽汁經(jīng)過預(yù)處理后進行高效液相色譜分析，根據(jù)分析結(jié)果繪制排泄曲線，分析3個目標(biāo)化合物在膽汁中的排泄經(jīng)時變化規(guī)律。
　　結(jié)果：
　　1.本實驗建立的HPLC-DAD含量測定方法在40min內(nèi)同時測定了8個蒽醌類成分。并成功的用于測定1

5、5個不同產(chǎn)地決明子中蒽醌類成分的含量。
　　2.實驗結(jié)果顯示，大鼠灌胃決明子總蒽醌提取物后，血漿中3個指標(biāo)成份的tmax均出現(xiàn)在給藥后的20～60min，表明蒽醌總體腸道吸收較快。尿液中3個指標(biāo)成份在72h內(nèi)的累計排泄量分別為給藥量的4.87％，2.74％和3.65％。32h內(nèi)的膽汁累計排泄量分別為給藥量的1.71％，7.2％和4.9％。表明腎臟排泄和膽汁排泄均是其體內(nèi)藥物排泄的重要途徑之一。目標(biāo)化合物在尿液中最大的排泄比率(不同

6、時間段尿中最大測得量/給藥量)均出現(xiàn)在給藥后的12～20h，膽汁中最大的排泄比率(不同時間段膽汁中最大測得量/給藥量)均出現(xiàn)在給藥后的4～8h。
　　結(jié)論：
　　1.本研究建立的HPLC-DAD法測定決明子中蒽醌含量的方法簡單、快速、準(zhǔn)確，適用于決明子的質(zhì)量控制。
　　2.SD雄性大鼠一次性灌胃給藥決明子總蒽醌提取物后，aloe-emodin，obtusifoline和chrysophanol的血藥濃度經(jīng)過非房室模型擬