咳喘膏有效成分東莨菪堿經(jīng)皮給藥藥代動力學研究.pdf

1、咳喘膏是目前臨床常用于治療單純型慢性氣管炎，喘息型慢性氣管炎，哮喘(除心臟引起的)等癥的外用中藥復方制劑，以芥子、甘遂、延胡索、細辛、洋金花等中藥與適當基質(zhì)制成的中藥復方制劑。由于中藥復方制劑中化學成分復雜，成分間相互干擾大，有效成分不明確，并且進入體內(nèi)后藥物各成分經(jīng)過吸收、代謝，可能發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，而不以原有形式存在，其間的過程復雜微妙，因此其藥動學的研究有別于化學藥物藥動學的研究。近年來，對局部外用藥或靶部位在皮膚的系統(tǒng)用藥研究，越來

2、越多地關注藥物的經(jīng)皮藥代動力學規(guī)律。一般采用以中藥復方中一種或幾種藥理作用明確，結(jié)構(gòu)已知的有效成分作為觀測指標，通過化學分析方法檢測動物給藥后，多個時間點的血清、尿液或其它組織液中指標成分的濃度，應用藥動學計算公式對測得的藥物濃度-時間數(shù)據(jù)進行處理，計算藥動學參數(shù)，為其臨床應用提供依據(jù)。東莨菪堿為咳喘膏中洋金花的主要成分，本課題以東莨菪堿為主要研究對象，闡明咳喘膏經(jīng)皮給藥藥代動力學行為。
　　 一、研究目的：
　　 采用

3、LC-MS/MS分析方法聯(lián)合微透析(microdialysis，MD)技術同步測定咳喘膏經(jīng)皮給藥后在皮膚和血液中規(guī)定時間點的東莨菪堿游離藥物濃度，觀察東莨菪堿在大鼠皮膚和血液的藥代動力學變化特點。
　　 二、研究方法：
　　 SPF級雄性SD大鼠，實驗前18小時脫去腹部和頸部毛發(fā)。分別在大鼠的腹部裸露皮膚和頸部右靜靜脈植入微透析探針，局部給予東莨菪堿凝膠后采用MD技術對大鼠皮膚和血液同步取樣，聯(lián)合高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術

4、實時監(jiān)測皮膚和血液中東莨菪堿的濃度變化，所得藥物濃度數(shù)據(jù)用BAPP2.0軟件處理。
　　 三、研究結(jié)果：
　　 1、從穩(wěn)定性和回收率兩方面優(yōu)化灌流速度和灌流液，最后選擇pH7.4等滲磷酸鹽緩沖液為最佳灌流液，灌流速度2μl/min。體外回收率的測定采用濃差法(增量法、減量法)、體內(nèi)回收率的測定采用減量法。體外回收率實驗結(jié)果顯示：線性探針和同心圓探針增量法和減量法測定的回收率一致；回收率隨灌流速度的增大而減小，探針的回收率

5、與溶媒中東莨菪堿的濃度無關。體內(nèi)線性探針和同心圓探針的回收率分別為(31.55±1.32)％和(19.06±2.00)％，東莨菪堿在線性探針和同心圓探針中回收率的變化基本保持穩(wěn)定。本研究提示MD技術可用于咳喘膏皮膚藥動學研究。
　　 2、咳喘膏經(jīng)皮給藥后在皮膚透析液中可檢測到東莨菪堿的存在，但由于咳喘膏為復方制劑，東莨菪堿的含量很低，東莨菪堿的濃度在實驗時間內(nèi)均保持很低的濃度，不能完整的表達出咳喘膏經(jīng)皮給藥后在皮膚的藥代動力學特

6、征，因此本研究中將單體東莨菪堿分離出來進行單體的經(jīng)皮藥動學研究，作為咳喘膏復方制劑的經(jīng)皮藥動學研究的代表藥物。
　　 3、SD大鼠皮膚局部給藥(0.5g/100g)于不同時間點皮膚進行微透析取樣，用上述建立的LC-MS/MS方法測定血漿及皮膚組織微透析液中東莨菪堿的濃度，根據(jù)所得的藥物濃度-時間曲線，采用非房室模型推算藥物動力學參數(shù)。結(jié)果表明，SD大鼠局部給予東莨菪堿凝膠后皮膚和血液內(nèi)藥物濃度達峰時間分別為125min和140m

7、in，達峰濃度分別為(939.4±167.8)ng/mL、(84.4±4.5)ng/mL，隨后均下降至一穩(wěn)定濃度值給藥后8小時，隨后穩(wěn)定緩慢下降。(AUCblood/AUCdermal)0-t的比值0.07，由于皮膚具有儲庫作用，皮膚內(nèi)藥物的平均滯留時間MRT(291.3±9.3)高于血液內(nèi)的藥物平均滯留時間(227.7±16.3)。
　　 四、研究結(jié)論：
　　 MD技術具有良好的時間和空間分辨性，聯(lián)合高效液相色譜質(zhì)譜監(jiān)