COX-2和EGFR在膀胱移行細胞癌中的表達及其相關(guān)性的實驗研究.pdf

1、背景和目的： 膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率居全身腫瘤的第五位，其中膀胱移行細胞癌(bladder transitional cell carcinoma，BTCC)占90％以上，其臨床特點主要是高發(fā)病率和高復(fù)發(fā)率。目前認為膀胱癌是一種多基因病，由多通路及多靶位調(diào)控，但其確切病因、發(fā)病機制及復(fù)發(fā)機制不清楚。近年來有關(guān)膀胱癌發(fā)病的分子機制一直是研究的熱點，其中包括基因突變、原癌基因激活、抑癌基因失活及凋亡失衡等多種發(fā)病機

2、制。環(huán)氧化酶(cyclooxygenase，COX)是前列腺素合成過程中的限速酶。研究表明，其異構(gòu)體COX-2蛋白表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可能通過促進腫瘤細胞增殖和抑制凋亡來參與腫瘤的病理進程。表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)是一種細胞膜表面的糖蛋白受體，由原癌基因c-erbB-1編碼，屬于I型受體酪氨酸激酶超家族的成員之一，EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通道的激活與細胞惡性轉(zhuǎn)化過程

3、相關(guān)。COX-2和EGFR在細胞增殖、凋亡、腫瘤血管新生及腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等過程中發(fā)揮重要作用，是腫瘤特異性、敏感性較高的腫瘤標記物。目前，COX-2和EGFR的表達與膀胱移行細胞癌臨床特征的關(guān)系以及二者的表達是否存在協(xié)同性，國內(nèi)、國外都鮮有文獻報道。 本課題旨在通過研究多種人膀胱移行細胞癌細胞系中COX-2和EGFR的mRNA和蛋白表達情況，探討COX-2和EGFR表達與膀胱移行細胞癌分化程度的關(guān)系；通過研究人膀胱移行細胞癌組

4、織中COX-2和EGFR的蛋白表達變化情況，探討COX-2和EGFR表達與膀胱移行細胞癌臨床分期、病理分級、腫瘤復(fù)發(fā)等臨床特征的關(guān)系。 材料和方法： 實驗分兩部分：第一部分：體外培養(yǎng)人膀胱移行細胞癌5637，BIU87，T24細胞，采用RT-PCR和western-blot方法檢測細胞中COX-2和EGFR的mRNA和蛋白表達情況，分析不同分化程度的人膀胱移行細胞癌細胞中COX-2和EGFR的mRNA和蛋白表達差異。第二

5、部分：應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測48例膀胱移行細胞癌患者腫瘤組織和10例正常膀胱粘膜組織中COX-2和EGFR的蛋白表達情況，從中分析COX-2和EGFR的表達情況與膀胱移行細胞癌臨床病理特征的關(guān)系。 結(jié)果： 1.在不同分化程度的膀胱移行細胞癌細胞5637，BIU87和T24中均存在COX-2和EGFR的mRNA的表達，其相對表達量隨著膀胱移行細胞癌的分化程度的降低而依次增高(P<0.05)。 2.COX-2和E

6、GFR蛋白在T24、BIU87、5637細胞中均表達，其中在T24細胞中表達均最高，在BIU87細胞中表達次之，5637細胞中表達均最低(P<0.05)。 3.48例膀胱移行細胞癌腫瘤組織中，COX-2陽性表達率為70.8％(34/48)，EGFR陽性表達率為66.7％(32/48)；對照組10例正常膀胱粘膜組織中COX-2和EGFR皆無陽性表達。膀胱移行細胞癌組COX-2、EGFR陽性表達率明顯高于正常膀胱粘膜組(P<0.01

7、)。 4.48例膀胱移行細胞癌腫瘤組織中，COX-2和EGFR的表達隨腫瘤組織病理分級、臨床分期的升高而升高，差異有顯著性(P<0.01)。同一標本中COX-2和EGFR的表達用Kappa值進行一致性評價，COX-2表達水平與EGFR表達水平之間呈正相關(guān)關(guān)系。(Kappa=0.419， P=0.004)。 5.復(fù)發(fā)組COX-2表達高于原發(fā)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，復(fù)發(fā)組EGFR表達高于原發(fā)組，但無顯著性差異(