噪聲性聽力損失易感性與GSTM1、GSTT1、MtDNA和CDH23基因多態(tài)性研究.pdf

1、噪聲性聽力損失(noise-inducedhearingloss，NIHL)是最常見的職業(yè)性疾患。NIHL與噪聲暴露量呈正相關，噪聲暴露強度越大，暴露時間越長，產(chǎn)生的聽力損失越嚴重。然而具體到每一個個體，相同的噪聲暴露量引起的聽力損失在程度上卻存在很大的差異；或者產(chǎn)生相同嚴重程度的聽力損失，易感個體與非易感個體相比需要更少的噪聲暴露量，說明NIHL存在明顯的個體易感性差異。 造成NIHL的主要因素是噪聲暴露量，然而有相當多的體內(nèi)

2、外因素可以影響NIHL的嚴重程度，從而造成易感性表型的差異。某些可吸入性化學毒物，如甲苯、一氧化碳與噪聲有協(xié)同作用，可以加重NIHL；某些耳毒性藥物如順鉑、氨基甙類抗生素等亦有類似作用。而機體內(nèi)在因素如低鎂、低鐵、高血脂等也會增加個體對NIHL的易感性。遺傳因素亦會影響個體對NIHL的易感性?；蚴沁z傳信息的攜帶者，隨著分子生物學技術在NIHL研究中的應用，近年已發(fā)現(xiàn)幾種與NIHL易感性相關的基因，如：谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶基因(GSTM1、

3、GSTT1)、線粒體基因(MtDNA)、鈣黏素23基因(CDH23)、質(zhì)膜Ca2+-ATP酶2突變(Pmca2)、超氧化物歧化酶(Sod1)、谷胱甘肽過氧化物酶基因去除(GPx1)、老年性耳聾基因(Ahl)和熱休克蛋白(HSPs)基因等。 研究噪聲性聽力損失易感基因與NIHL的關系對于NIHL預防具有重要的意義。如果能確認NIHL易感基因，就有可能在暴露于噪聲環(huán)境之前將NIHL易感個體篩選出來，有效地減少NIHL的發(fā)生，達到一級

4、預防的目的。本課題研究與NIHL相關的幾個基因，為確定這幾個基因與NIHL的關系提供一定的理論依據(jù)，為NIHL的篩查提供有價值的遺傳標記，并為研究其它易感基因提供一定的理論基礎和技術方法指導。 研究目的通過病例-對照研究方法和聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction，PCR)技術，了解NIHL易感性與GSTM1、GSTT1、MtDNA和CDH23基因多態(tài)性的關系。為NIHL易感個體的篩選提供基礎資料，更好地

5、預防NIHL的發(fā)生。 材料和方法：1.研究對象的選擇選擇噪聲暴露強度在75～105dB的工人為研究對象，設計調(diào)查表逐個對研究對象進行調(diào)查。 2.基因組DNA抽提采用基因組抽提試劑盒抽提外周血DNA。 3.GSTM1、GSTT1、MtDNA和CDH23基因多態(tài)性檢測利用引物設計軟件并參考文獻分別設計GSTM1、GSTT1、MtDNA和CDH23基因相應位點的引物，進行PCR擴增。以Albumin為內(nèi)對照，雙重PCR

6、方法擴增GSTM1和GSTT1基因，鑒定基因型；采用巢式PCR方法檢測mtDNA4977缺失；常規(guī)PCR方法擴增CDH23基因，再分別進行限制性酶切反應判斷CDH23-rs1227049和CDH23-rs1227051位點基因型。 4.數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析應用SPSS11.0軟件包進行統(tǒng)計分析，檢驗顯著水平為0.05。噪聲累積暴露量與NIHL的量效關系、基因型頻率的組間比較用x2檢驗；Logistic回歸分析噪聲累積暴露量與NIH

7、L的關系；多因素Logistic回歸分析方法對個體間年齡和累積噪聲暴露量等因素進行校正。 結(jié)果：1.研究對象的一般情況本次研究共篩查出符合條件的對象254例，其中病例和對照各127例，年齡19.0～56.0(y)，平均36.1±9.3(y)；接噪工齡1～37(y)，平均11.0±7.6(y)；噪聲暴露強度75.0～102.0(dB)，平均90.7±8.4(dB)；累積噪聲暴露量52.3～96.1(dB)，平均79.6±8.5(d

8、B)。病例組與對照組間年齡、接噪工齡、噪聲暴露強度、累積噪聲暴露量差異不具有統(tǒng)計學意義。 2.累積噪聲暴露量與噪聲性聽力損失的關系按照累積噪聲暴露量的大小對其進行分級，計算不同級別下的聽力損失患病率，結(jié)果表明：隨著累積噪聲暴露量的增加，噪聲性聽力損失患病率明顯升高，由34.8％上升到70.0％，累積噪聲暴露量與噪聲性聽力損失間存在劑量-反應關系(x2=33.3，P值＜0.05)。 3.累積噪聲暴露量、年齡與噪聲性聽力損失

9、的Logistic回歸分析對累積噪聲暴露量、年齡與噪聲性聽力損失進行了Logistic回歸分析，結(jié)果表明：累積噪聲暴露量與噪聲性聽力損失的優(yōu)勢比為1.087，P值＜0.05，表明累積噪聲暴露量與噪聲性聽力損失間存在劑量-反應關系；年齡與噪聲性聽力損失的優(yōu)勢比為1.041，P值＜0.05，表明年齡也是影響噪聲性聽力損失的危險因素之一。 4.GSTM1、GSTT1基因與噪聲性聽力損失易感性對123例病例和123例對照進行了GSTM1

10、基因分型，結(jié)果表明：病例組和對照組GSTM1基因缺失率分別為69.1％和56.1％，差異具有統(tǒng)計學意義(x2=4.45，P＜0.05)，攜帶GSTM1(一)基因型發(fā)生噪聲性聽力損失的危險性是攜帶GSTM1(+)基因型者的1.75倍。對118例病例和114例對照對照進行了GSTT1基因分型，結(jié)果表明：病例組和對照組GSTT1基因缺失率分別為50.8％和57.9％，差異不具有統(tǒng)計學意義(x2=1.16，P＞0.05)。GSTM1和GSTT1

11、聯(lián)合基因型分析表明：在增強噪聲性聽力損失易感性方面，GSTM1和GSTT1基因型之間可能不存在聯(lián)合作用。 5.MtDNA4977缺失與噪聲性聽力損失易感性對117例病例和122例對照進行了mtDNA4977缺失情況檢測，結(jié)果表明：病例組和對照組的mtDNA4977缺失率分別為95.7％和95.9％，差異無統(tǒng)計學意義(x2=0.01，P＞0.05)。 6.CDH23基因與噪聲性聽力損失易感性對127例病例和127例對照進行

12、了CDH23基因多態(tài)性檢測，結(jié)果表明：CDH23-rs1227049位點在病例組CC、CG和GG基因型頻率分別為39.6％、14.6％和45.8％，等位基因C和G的頻率分別為46.9％和53.1％；對照組三種基因型的頻率分別為50.9％、20.0％和29.1％，等位基因C和G的頻率分別為60.9％和39.1％。CDH23-rs1227051位點在病例組TT、CT和CC基因型頻率分別為82.3％、17.7％和0，等位基因T和C的頻率分別為

13、91.2％和8.8％。；對照組三種基因型的頻率分別為74.3％、25.7％和0，等位基因T和C的頻率分別為87.1％和12.9％。CDH23-rs1227049和CDH23-rs1227051位點的基因型分布及其等位基因頻率在病例組和對照組之間差異均無統(tǒng)計學意義(P值＞0.05)。多因素Logistic回歸分析方法對個體間年齡、工齡、噪聲暴露強度和累積噪聲暴露量等因素進行校正后，未發(fā)現(xiàn)CDH23-rs1227049和CDH23-rs12

14、27051兩單核苷酸位點任一基因型噪聲性聽力損失的危險性有顯著性提高(P值＞0.05)。 結(jié)論：1.隨著累積噪聲暴露量的增加，噪聲性聽力損失患病率明顯升高，累積噪聲暴露量與噪聲性聽力損失間存在劑量-反應關系。 2.職業(yè)性噪聲暴露人群中，GSTM1基因缺失可能是發(fā)生噪聲性聽力損失的易感因素之一；而GSTT1基因缺失可能不是發(fā)生噪聲性聽力損失的易感因素之一；在增強噪聲性聽力損失易感性方面，GSTM1和GSTT1基因之間可能不