冷自體血心臟停搏液對離體兔心肌能量代謝的影響.pdf

1、目的：本研究通過對比冷自體血停搏液（cold autologous blood cardioplegia）、康斯特液(Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate,HTK)與改良托馬斯（St.Thomas）停搏液對離體兔心肌細(xì)胞三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）、二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）、一磷酸腺苷(adenosine monophospha

2、te，AMP)含量及線粒體損傷程度的影響，探討冷自體血心臟停跳液對缺血-再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）心肌的能量代謝的影響及其對心肌保護(hù)的機(jī)制。
　　方法：選擇健康新西蘭白兔60只，隨機(jī)分為3組：A組（冷自體血停搏液組，n=20）、B組（HTK液組，n=20）及C組（St.Thomas液組，n=20）；B組及C組開胸后則直接取出心臟，A組兔開胸后經(jīng)主動脈根部抽血，按血液：晶體母液4∶1比例配置，浸入冰屑

3、中制成4℃冷自體血停搏液備用；心臟取出后以4℃的重碳酸鹽緩沖液（Krebs-Henseleit buffer,K-H液）簡單沖洗，迅速連接于Langendorff灌注裝置，并灌注通以混合氣(O2：CO2=95％：5％)的37℃K-H液，灌注壓為100cmH2O，灌注15min達(dá)平衡狀態(tài)，記錄心率及分鐘冠狀動脈流量；各組分別灌注4℃的冷自體血停搏液、HTK停博液及St.Thomas停搏液使心臟停搏，劑量為20ml/kg，灌注壓力100cm

4、H2O，停搏30分鐘再灌注一次，灌注劑量為10ml/kg，灌注壓力同前；心臟停搏60min，然后K-H液復(fù)灌15min，記錄心率及分鐘冠狀動脈流量，結(jié)束實(shí)驗(yàn)，快速取下心臟并吸凈表面水分，取心肌標(biāo)本測定心肌含水量，應(yīng)用高效液相色譜法(High performance liquid chromatography,HPLC)測定心肌ATP、ADP、AMP含量，透射電鏡下觀察心肌線粒體損傷程度。
　　結(jié)果：
　　1.冠狀動脈流出液(

5、coronary flow,CF)及恢復(fù)百分比：停跳前A、B、C三組之間比較，CF值無顯著性差異（P＞0.05），復(fù)灌后CF值A(chǔ)、B、C三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，CF恢復(fù)百分比三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.心率（heart rate,HR）：停跳前各組之間HR比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），復(fù)灌15分鐘心跳穩(wěn)定后，三組間 HR無明顯差異（P＞0.05)。HR恢復(fù)百分比三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞

6、0.05)。
　　3.心肌含水量：A組與B組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P＞0.05)；A組與C組間差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），B組與C組組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A組、B組心肌含水量明顯低于C組。
　　4.心肌組織中ATP、ADP、AMP含量：ATP、ADP含量在A組與B組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，A組與C組，B組與C組組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），A組、B組ADP心肌含量明顯高于C

7、組，三組間AMP含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)
　　5.心肌線粒體損傷程度及Flameng評分：同C組比較，A組與B組Flameng評分均較C組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A組與B組組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：冷自體血停搏液可提高離體兔心肌細(xì)胞ATP、ADP含量，能減輕缺血-再灌注對離體兔心肌細(xì)胞線粒體的損傷；這顯示冷自體血心臟停搏液可促進(jìn)術(shù)后心肌能量代謝的恢復(fù)，對缺血-再灌注心肌起保護(hù)