摘除頸上神經(jīng)節(jié)對成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)再生及學(xué)習(xí)記憶的影響.pdf

1、一方面，認(rèn)知科學(xué)是當(dāng)前生命科學(xué)中最引人矚目、發(fā)展最迅速的學(xué)科之一。隨著神經(jīng)科學(xué)的發(fā)展，神經(jīng)發(fā)生現(xiàn)象逐漸在嚙齒類、靈長類動物和人類得以廣泛證實(shí)。很多學(xué)者認(rèn)為，在成人海馬齒狀回中神經(jīng)元的再生伴隨著人的一生。 另一方面，交感神經(jīng)是神經(jīng)系統(tǒng)中的一個(gè)重要的組成部分，而頸上神經(jīng)節(jié)則是通往腦顱的主要交感輸入纖維，這些纖維包含著胺類、氨基酸類、肽類等多種神經(jīng)遞質(zhì)，發(fā)揮著各自不同的功能，對靶器官進(jìn)行精確的調(diào)控以適應(yīng)機(jī)體的需求。目前，除了對已知的頸

2、上神經(jīng)節(jié)參與特殊神經(jīng)遞質(zhì)的分泌和運(yùn)輸、運(yùn)動及血壓節(jié)律性的調(diào)控等方面的作用外，還不斷有新的發(fā)現(xiàn)。但是，交感神經(jīng)系統(tǒng)還有很多未知的生理功能有待于進(jìn)一步的研究。 本論文通過摘除成年大鼠頸上神經(jīng)節(jié)手術(shù)，探討去頸上神經(jīng)節(jié)(SCG)對成年大鼠海馬齒狀回神經(jīng)再生及學(xué)習(xí)記憶的影響，進(jìn)而探索交感神經(jīng)節(jié)對哺乳動物學(xué)習(xí)記憶的調(diào)節(jié)機(jī)制，為交感神經(jīng)系統(tǒng)臨床研究提供實(shí)驗(yàn)資料。 本實(shí)驗(yàn)將大鼠分為雙側(cè)摘除神經(jīng)節(jié)組(B SCGe)、單側(cè)摘除神經(jīng)節(jié)組(US

3、CGe)和對照組(C)。手術(shù)后大鼠呈現(xiàn)Homer綜合癥：手術(shù)側(cè)面部瞳孔縮小、瞼裂變小、眼球后陷，大鼠食欲不振。 運(yùn)用Morris水迷宮測定手術(shù)后學(xué)習(xí)記憶能力的改變。結(jié)果顯示：在定位航行實(shí)驗(yàn)中，通過5d的訓(xùn)練，三組大鼠均獲取了對平臺位置的參考記憶，搜索平臺的策略都由邊緣式變?yōu)橼呄蚴交蛑本€式，訓(xùn)練潛伏期下降。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，BSCGe組潛伏期值顯著高于U SCGe和C組的(P<0.05)，而單側(cè)摘除手術(shù)組和對照組五天內(nèi)的訓(xùn)練潛伏期

4、則無差異(P>0.05)。在空間搜索實(shí)驗(yàn)中，C組和U SCGe組大鼠由于能夠記住原平臺的位置，反復(fù)穿越原平臺所在象限(第Ⅳ象限)，運(yùn)動軌跡主要集中在原平臺所在位置，而B SCGe組大鼠由于不能準(zhǔn)確記憶平臺的位置，則在其它象限運(yùn)動相對較其他兩組多。以平臺為靶心，統(tǒng)計(jì)三組大鼠軌跡分布在靶心和9環(huán)靶的百分率，比較記憶得分率，結(jié)果顯示B SCGe組大鼠記憶得分率顯著低于C組和U SCGe組(P<0.05)。 本實(shí)驗(yàn)還運(yùn)用神經(jīng)元前體細(xì)胞的

5、標(biāo)志物DCX(Doublecortin)免疫組織化學(xué)染色方法檢測海馬齒狀回神經(jīng)元前體細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果顯示：DCX陽性細(xì)胞呈黃色或棕黃色顆粒，而且在齒狀回分子層(ML)、顆粒層(GCL)和顆粒下層(SGZ)的分布是不均勻的。DCX標(biāo)記細(xì)胞胞體位于SGZ或者GCL，樹突沿著板層的垂直方向穿行，跨越GCL，內(nèi)分子層和中分子層。C組大鼠顆粒下層的DCX陽性細(xì)胞有不少排列成簇；U SCGe組大鼠呈簇排列較C組少；B SCGe組的DCX陽性細(xì)胞

6、較少，而絕大多數(shù)都是單個(gè)散在分布。通過DCX免疫組化染色定量分析結(jié)果顯示，與C組大鼠相比，U SCGe組和B SCGe組大鼠DCX陽性細(xì)胞數(shù)目及密度均減少，其中B SCGe組與C組DCX陽性細(xì)胞數(shù)目差異極顯著(P<0.01)。 從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知，與C組比較，U SCGe組大鼠的Morris水迷宮成績比B SCGe組好，且DCX陽性細(xì)胞數(shù)量、密度比B SCGe組大，這似乎說明單側(cè)SCG切除后，其對側(cè)的SCG能進(jìn)行了某種功能上的補(bǔ)

7、償，所以我們進(jìn)一步切除大鼠單側(cè)頸上神經(jīng)節(jié)，將其對側(cè)SCG(手術(shù)組)進(jìn)行石蠟、半薄切片制作，運(yùn)用光鏡觀察、體視學(xué)方法與正常SCG進(jìn)行比較來探討其中的原因，為頸上神經(jīng)節(jié)損傷的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)手術(shù)30天后，手術(shù)組SCG的主細(xì)胞的神經(jīng)節(jié)體積(Vg)，神經(jīng)元的數(shù)密度(Nv)、神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量(N)、體密度(Vv)等參數(shù)與對照組相比均未出現(xiàn)顯著差異，但是非神經(jīng)元的數(shù)密度(Nv)、細(xì)胞數(shù)量(N)及體密度則發(fā)生極顯著性增多(P<0.01)。