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文檔簡介
1、目的:探討ghrelin對小鼠海馬神經(jīng)再生、空間記憶的獲取及海馬功能性記憶環(huán)路形成的作用。
方法:本研究結(jié)合整體行為學(xué)分析及免疫組織化學(xué)技術(shù)。將小鼠(C57/B16)隨機分為4組,每組10只,均腹腔注射等量BrdU(100 mg/kg,每天兩次連續(xù)注射5天)以標記海馬齒狀回顆粒細胞下區(qū)(Subgranular Zone,SGZ)的增生細胞。同時,處理組小鼠接受ghrelin腹腔注射(80 ug/kg,一天一次,連續(xù)注射8天
2、),對照組小鼠接受等體積的生理鹽水處理。注射后1周及5周,同時對4組(ghrelin+1w,ghrelin+5w,ns+1w及ns+5w)小鼠行水迷宮訓(xùn)練及空間記憶測試。測試后90分鐘取腦,進行免疫組化分析。
結(jié)果:
1.熒光免疫組化結(jié)果表明,ghrelin處理組(ghrelin+1w, ghrelin+5w) BrdU免疫陽性(BrdU+)細胞數(shù)顯著多子同時期生理鹽水對照組(ns+1w, ns+5w)。但g
3、hrelin+5w及ns+5w組BrdU+細胞數(shù)目均顯著少于1w組。
2.BrdU+/DCX+雙標結(jié)果顯示,ghrelin+1w處理組BrdU+/DCX+雙標的新生神經(jīng)元數(shù)目明顯多于同時期生理鹽水對照組(ns+1w)。
3.由于焦慮可影響神經(jīng)再生,我們考察了ghrelin對動物焦慮的影響。高架十字迷宮和曠場實驗結(jié)果表明,ghrelin(80 ug/kg)腹腔注射不影響小鼠的焦慮狀態(tài)。
4.水迷宮
4、實驗表明,4組小鼠的空間學(xué)習(xí)及記憶獲取能力無差別??臻g記憶測試激活的齒狀回顆粒神經(jīng)元(Fos+)數(shù)目亦相同,提示ghrelin(80 ug/kg)預(yù)處理不影響小鼠空間記憶的獲取。
5.BrdU+/Fos+雙標結(jié)果顯示,c-fos+神經(jīng)元在新生神經(jīng)元(BrdU+)中有表達,說明新生神經(jīng)元參與功能性海馬記憶環(huán)路的形成。但ghrelin+5w組BrdU+/Fos+雙標的新生神經(jīng)元數(shù)與對照組(ns+5w組)相比無差別,表明ghre
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