小鼠流感病毒性肺炎模型發(fā)熱介質的變化規(guī)律及銀翹散的干預作用.pdf

1、病毒性疾病是目前世界上發(fā)病率最高的傳染性疾病之一。據現(xiàn)有資料，引起人類傳染病的病原體中，75％是病毒。病毒對人類健康影響極大。自抗生素問世以來，許多細菌性疾病得到了有效的控制，但對病毒病目前還沒有發(fā)現(xiàn)特效藥，對病毒性疾病的治療尚處于一種探索狀態(tài)。因此，病毒性疾病的研究成為目前的熱點之一。
　　 病毒性發(fā)熱是病毒感染后的一個主要癥狀。它是以病毒作為發(fā)熱激活物作用于機體產內生致熱原細胞，合成和分泌內生致熱原，內生致熱原再直接或間接作

2、用于體溫調節(jié)中樞，引起體溫調節(jié)中樞調定點上移而導致。目前的發(fā)熱模型中，主要為酵母、內毒素作用于家兔、大鼠等引起，這些模型僅僅從發(fā)熱方面對發(fā)熱機制進行了探討。小鼠流感病毒性肺炎模型為目前比較成熟的模型，被廣泛應用于科研中，但對其研究主要從炎癥、免疫、病理等方面進行探討。中醫(yī)藥具有抗炎、解熱、提高免疫力等功效。單獨分析中醫(yī)藥的某一方面的作用對評價中醫(yī)藥的療效有失偏頗。
　　 由于小鼠體溫不穩(wěn)定，在小鼠流感病毒性肺炎模型測定體溫沒有明

3、顯意義。為此，我們擬采用流感FM1病毒感染小鼠（昆明種小鼠和SCID小鼠）復制小鼠流感病毒性肺炎模型，選用經典的內生致熱原（IL-1，TNF-α）、中樞正調節(jié)介質（PGE2）、中樞負調節(jié)介質（AVP）作為觀察對象，利用銀翹散作為干預藥物，通過銀翹散藥效試驗評價銀翹散的抗病毒作用；通過銀翹散對IL-1，TNF-α，PGE2，AVP4種介質的影響，來探討小鼠流感病毒性肺炎模型評價解熱作用的價值，為科研提供一定的理論依據。
　　 1.

4、小鼠流感病毒性肺炎模型內生致熱原。TNF-α，IL-1的變化規(guī)律研究本實驗采用流感FM1株病毒感染小鼠復制小鼠流感病毒性肺炎模型，觀察內生致熱原TNF-α，IL-1的變化規(guī)律。結果顯示，空白對照組TNF-α含量在試驗期間保持平穩(wěn)狀態(tài)，數值維持在11.50pg/mL，左右。模型組TNF-α含量從感染后第1天起即明顯升高，第3天達高峰，隨后一直維持高水平狀態(tài)，與空白對照組比較差異有顯著性意義（P<0.05）。空白對照組IL-1含量第1～3天

5、呈上升趨勢，到第3天達到最高，第4～5天逐漸降低。模型組IL-1含量第1天顯著升高，第2，3，4天稍有下降，基本維持在一個高水平狀態(tài)，明顯高于空白對照組，與空白對照組比較差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。
　　 2.小鼠流感病毒性肺炎模型中樞正、負體溫調節(jié)介質PGE2，AVP的變化規(guī)律本實驗采用流感FM1病毒感染小鼠復制小鼠流感病毒性肺炎模型，觀察中樞正、負體溫調節(jié)介質PGE2，AVP的變化規(guī)律。PGE2結果顯示，

6、空白對照組PGE2含量在試驗期間保持平穩(wěn)狀態(tài)，數值維持在120pg/mg左右。模型組PGE2水平走勢為第1，2天逐漸升高，第3天稍微下降，第4天顯著升高，達到最大值，第5天略降，與空白對照組比較差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。AVP結果顯示，空白對照組AVP含量第1～4天逐漸升高，到第4天達到最高，第5天則顯著降低。病毒感染模型組AVP水平走勢為第1天顯著升高，第2天有比較明顯的降低，第3天又升高，隨后維持在一個高水平狀

7、態(tài)，與空白對照組比較差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。
　　 3.銀翹散對流感病毒FM1感染小鼠的治療作用本實驗結果顯示，空白對照組小鼠精神狀態(tài)良好，機警，活動敏捷，毛發(fā)有光澤，飲食良好，呼吸均勻，體重自然增加。模型組小鼠第1天無明顯的異常癥狀。第2天稍有倦怠，毛發(fā)出現(xiàn)凌亂，漸失光澤，呼吸急促，不喜活動，易驚。第3天上述癥狀加重，開始死亡，死亡時出現(xiàn)抽搐、痙攣癥狀。銀翹散中、小劑量給藥組死亡率顯著降低，死亡保護率顯

8、著升高，與模型組比較差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）；銀翹散大、中劑量組能夠顯著降低小鼠模型的肺指數，與模型組比較差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。
　　 4銀翹散對流感病毒FM1感染小鼠的形態(tài)學及病理學觀察本實驗研究結果顯示，空白對照組肺組織呈現(xiàn)均勻的淡紅色，各肺葉表面光滑、潤澤，無出血，無滲出物；用手觸摸質地柔軟，有彈性。顯微鏡下觀察空白對照組小鼠肺泡、肺泡囊、肺泡管、肺泡隔形態(tài)完整，細胞呈紅色，

9、肺間質未見炎癥反應，肺泡大小正常，僅在小支氣管周圍有少量淋巴細胞。流感病毒FM1感染模型組肉眼可見正常組織結構消失，模型組多葉肺甚至全肺表面血管擴張充血、腫脹，可見點片狀壞死及出血梗死灶，顏色暗紅至褐色；用手觸摸可感覺到肺質地變硬，表面凹凸不平。顯微鏡觀察有大量的淋巴細胞及漿細胞，面積較大，小支氣管周圍有較多的淋巴細胞。肺指數顯著高于正常組。銀翹散大劑量組顯示小鼠肺泡、肺泡囊、肺泡管、肺泡隔形態(tài)最為完整，細胞呈紅色，細胞核呈藍色，肺間質

10、未見明顯炎癥反應，肺泡大小正常，僅在小支氣管周圍有少量淋巴細胞。其肺指數與模型組相比較也顯著降低。銀翹散中劑量組病理形態(tài)觀察顯示肺部病變較模型組有顯著改善，肺組織形態(tài)結構較為完整，偶見淋巴細胞浸潤。
　　 5.銀翹散對內生致熱原TNF-α，IL-1及體溫調節(jié)中樞介質PGE2，AVP的影響昆明種小鼠結果顯示：①模型組TNF-α，含量顯著升高，銀翹散大、中劑量組TNF-α含量較病毒感染組明顯降低，與模型組比較差異有顯著性意義（P<0

11、.05）。銀翹散小劑量組TNF-α含量與病毒感染模型組比較，無明顯改變（P>0.05）。②病毒感染模型組IL-1含量顯著升高。銀翹散大、中劑量組與病毒感染模型組比較，IL-1含量明顯降低，差異具有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）；銀翹散小劑量組與病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。⑨病毒感染模型組PGE2含量明顯升高。銀翹散大、中劑量組PGE2含量與病毒感染模型組比較明顯降低，差異有顯著性意義（P<0.05或P

12、<0.01）。銀翹散小劑量組PGE2含量與病毒感染模型組比較差異無顯著性意義（P>0.05）。④病毒感染模型組AVP含量明顯升高。銀翹散大劑量組AVP含量低于病毒感染模型組。銀翹散中、小劑量組AVP含量稍低于病毒感染組，但與病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。
　　 SCID小鼠結果顯示：①流感病毒模型組TNF-α含量顯著升高，銀翹散中、小劑量組TNF-α含量較病毒感染組明顯降低，銀翹散大劑量組TNF-α含量與

13、病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。②病毒感染模型組IL-1含量顯著升高，銀翹散中、小劑量組與病毒感染模型組比較，IL-1含量明顯降低，銀翹散大劑量組與病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。③病毒感染模型組PGE2水平明顯降低，銀翹散大劑量組PGE2含量比病毒感染模型組明顯升高，銀翹散中、小劑量組與病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。④病毒感染模型組AVP含量明顯升高，銀翹散大劑量組A

14、VP含量低于病毒感染模型組，與病毒感染模型組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。銀翹散中、低劑量組AVP含量顯著低于病毒感染組，與病毒感染模型組比較，差異具有非常顯著意義（P<0.01）。
　　 結論
　　 ●小鼠流感病毒性肺炎模型中內生致熱原TNF-α，IL-1及體溫調節(jié)中樞正調節(jié)介質PGE2和負調節(jié)介質AVP在病毒感染后第1～5天呈現(xiàn)逐漸升高的變化規(guī)律。其中在病毒感染后第3天上述4個指標變化最明顯，由此，我們可以