大鼠腰椎蛛網(wǎng)膜下腔不同給藥方式分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:在疼痛、脊髓損傷給藥等動物試驗中,常常需要蛛網(wǎng)膜下腔給藥。目前大鼠蛛網(wǎng)膜下腔給藥途徑主要包括蛛網(wǎng)膜下腔重復穿刺、蛛網(wǎng)膜下腔留置導管兩種方式,其中留置導管又分為椎板切除置管術以及經(jīng)皮置管術。本研究旨在對目前廣泛應用的三種給藥途徑進行比較,具體內容包括評估其有效性及各自相應的缺陷,以找出最佳的給藥方式。
  方法:將實驗組SD大鼠分為三組,分別作如下手術處理:重復腰椎穿刺,椎板切除并植入導管以及經(jīng)皮導管植入。并設置空白對照組大鼠

2、。
  (1)手術前后體重測定:分別于術前及術后第1、2、3、5、7、10、14稱量記錄動物的體重。將24只大鼠隨機分成4組:正常對照組,腰椎穿刺組,椎板切除置管組以及經(jīng)皮置管組,每組6只,每只大鼠稱量3次取平均值。
  (2)行為學評估:為了比較手術對動物行為的影響,我們于術后第2天開始對實驗鼠的一般行為及神經(jīng)生物學行為進行評估。具體觀察指標包括激惹、痛覺過敏以及僵直發(fā)作。激惹主要通過自發(fā)發(fā)聲及煩亂不安來判斷;痛覺過敏表現(xiàn)

3、為逃跑反射或者輕刺激大鼠側面皮膚引起的發(fā)聲反應。僵直發(fā)作的檢驗方法為:使大鼠的前爪略高于后爪來誘發(fā)。其強度由2分鐘內僵直發(fā)作的最長時間來衡量。如果僵直反應明顯,則觀察從僵直發(fā)作開始持續(xù)到第一次運動的時間間隔。并記錄腦脊液漏、截癱、膀胱功能障礙、自傷行為等發(fā)生情況。
  (3)Rota-Rod跑步行為學測試:檢查手術前后大鼠運動平衡與協(xié)調功變化。
  (4)傷害感受性測試:對大鼠足底進行熱輻射刺激測試熱痛敏;測定大鼠的機械性縮

4、足反射閾值來評價大鼠機械痛敏。
  (5)甩尾試驗:甩尾試驗分別于第0天(術前)、1、3、7、14天進行,評價穿刺組與置管組的抗痛效應。
  (6)脊髓HE染色:評價穿刺組與置管組脊髓背側的炎癥反應情況。
  (7)利多卡因麻痹測試、甲苯胺藍染色試驗:確定穿刺針以及導管尖端的具體位置,評價其給藥的精確度。
  結果:腰椎蛛網(wǎng)膜下腔重復穿刺手術成功率較低,并且引起較多的并發(fā)癥:包括異常的神經(jīng)行為學表現(xiàn)以及嚴重的運動

5、功能障礙、痛覺過敏、脊髓背側嚴重的局部炎癥反應。蛛網(wǎng)膜下腔留置導管術可以方便的進行后續(xù)給藥,特別適合長期的藥理學及行為學研究。經(jīng)椎板切除置管術由于創(chuàng)傷大,嚴重影響動物的生理功能,并且容易引起手術本身相關的脊髓額外損傷,其應用受到一定的限制。而經(jīng)皮置管術具有更高的手術成功率,而且創(chuàng)傷較小,僅引起輕度的腦脊液漏、很弱的感覺運動障礙以及腰髓背側極輕微的組織病理學改變,其給藥定位也較準確。
  結論:實驗結果表明,相比于重復穿刺與椎板切除

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