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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文低分子肝素及肝素結(jié)合型表皮生長因子對人早孕期滋養(yǎng)細胞生物學(xué)功能的影響姓名:吳曉霞申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:張建平20070520◇!之!童碩士論文中文摘要2、探討LMWH是否可以對體外培養(yǎng)的滋養(yǎng)細胞產(chǎn)生作用,影響其增殖、侵襲及分化能力。3、LMl|『H、HB—EGF單獨或共同作用于滋養(yǎng)細胞,觀察Ⅲ州和HBFM;F是否存在對滋養(yǎng)細胞影響的相互作用。研究方法1滋養(yǎng)細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定人早孕期絨毛組織取自
2、復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院5~10孕周行人工流產(chǎn)的正常妊娠婦女。按照胰蛋白酶/DNA酶I消化和密度梯度離心兩步法分離滋養(yǎng)細胞。分離后的細胞用免疫細胞化學(xué)法鑒定細胞及其純度。20%胎牛血清的叫跚高糖培養(yǎng)液體外培養(yǎng)。2姍H對人早孕期滋養(yǎng)細胞生物學(xué)功能的影響21實驗分組:LMWH組(成分為Enoxaparin,藥物終濃度為0025Iu/m1、025Iu/m1、25IU/ml、25IU/m1、250IU/m1),對照組(即蹦蹦培養(yǎng)液組)。22枷嚇增
3、殖試驗研究不同濃度LMWH對滋養(yǎng)細胞增殖能力的影響作用。將人早孕滋養(yǎng)細胞加入預(yù)先包被Matrigel的96孔培養(yǎng)板,培養(yǎng)過夜。在培養(yǎng)液中添加各種處理因素,繼續(xù)培養(yǎng)48h。行w丌比色試驗檢測細胞增殖情況。23Transwell侵襲試驗研究不同濃度LMWH對滋養(yǎng)細胞侵襲能力的影響作用。預(yù)先將Transwell板包被Matrigel備用。往上室加入滋養(yǎng)細胞懸液,并分別加入各種處理因素;下室加入叫聊高糖培養(yǎng)液,37℃,5%C0:培養(yǎng)箱中孵育48
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