腫瘤細(xì)胞過表達(dá)mCRPs與自分泌細(xì)胞因子相關(guān)性和免疫逃逸機制研究.pdf

1、山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文腫瘤細(xì)胞過表達(dá)mCRPs與自分泌細(xì)胞因子相關(guān)性和免疫逃逸機制研究姓名：趙勇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：張玲20100501山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文1 0 0 u n i t s ／m l 、3 0 0 u n i t s ／m l 、1 0 0 0 u n i t s ／m l 的r h l F N —Y 在處理第5 天對A 5 4 9 細(xì)胞增殖的影響；檢測r h l F N —Y 、r h

2、l F N - Q 對A 5 4 9 細(xì)胞增殖動力學(xué)的影響。3 ．流式細(xì)胞術(shù)檢測作用終質(zhì)量濃度分別為O ．1 9 9 ／m l 和O ．3 9 9 ／m 的抗V E G F 抗體和抗I L ．8 抗體作用于A 5 4 9 細(xì)胞2 4 h 、4 8 h 和7 2 h C D 4 6 、C D 5 5 和C D 5 9 表達(dá)變化；檢測r h l F N —Y 、r h l F N ．Q 對A 5 4 9 細(xì)胞C D 4 6 、C D 5 5

3、 和C D 5 9 表達(dá)的影響。4 ．W e s t e r nb l o t t i n g 檢測作用終質(zhì)量濃度為O ．1 p , g ／m 抗V E G F 抗體作用7 2 h ，A 5 4 9 細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子K L F 2 和磷酸化N F ．r , B p 6 5 蛋白水平變化；檢測r h l F N ．Y 、r h l F N - Q 對A 5 4 9 細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子K L F 2 和磷酸化N F ．詔p 6 5 蛋白表達(dá)的

4、影響。結(jié)果1 ．A 5 4 9 細(xì)胞在m R N A 和蛋白水平表達(dá)C D 4 6 、C D 5 5 和C D 5 9 。2 ．A 5 4 9 細(xì)胞表達(dá)V E G F 及其受體( K D R 和F L T l ) m R N A ，表達(dá)I L ．8 及其受體( C X C R l 和C X C R 2 ) m R N A 。3 ．不同作用終質(zhì)量濃度的抗V E G F 抗體( O ．8 9 9 ／m l 、0 ．4 I J t g ／m

5、l 、0 ．2 9 9 ／m l 、O ．1 9 9 ／m 1 )對A 5 4 9 細(xì)胞增殖具有明顯的抑制作用，其作用4 8 h ，各濃度組抑制率分別為( 1 2 ．0 0 ±0 。6 2 ) ％、( 9 ．4 6 ±1 ．9 9 ) ％、( 1 7 ，9 8 ±1 ．6 1 ) ％和( 1 4 ．6 3 ±0 ．5 8 ) ％( 均為P < O ．0 5 ) 。不同作用終質(zhì)鼉濃度的抗I L

6、 一8 抗體( 2 。4 9 9 ／m l 、1 ．2 9 9 ／m l 、0 ．6 I ．t g ／m l 、0 ．3 I ，t g ／m 1 ) 對A 5 4 9 細(xì)胞增殖未見影響：4 ．作用終質(zhì)量濃度為O ．1 r t g ／m l 的抗V E G F 抗體封閉7 2 h ，對A 5 4 9 細(xì)胞C D 5 5和C D 5 9m R N A 和蛋白表達(dá)具有明顯的抑制作用，C D 5 5m R N A 相對定量值由1 ．2 6 下降

7、至1 ．1 1 ，C D 5 9 相對定量值由O ．7 6 下降至o ．6 0 。C D 5 5 蛋白的平均熒光強度由3 0 ．4 ±1 ．7 2 下降至2 5 ．9 + 0 ．7 6 ，C D 5 9 平均熒光強度由2 4 8 3 ．4 ±1 1 ．4 2 下降至1 8 1 9 ．1 - - + 2 2 ．4 3 ( 均為p < O ．0 5 ) 。對C D 4 6 m R N A 和蛋白表達(dá)未見影響。作用終

8、質(zhì)量濃度為0 ．3 9 9 ／m l 抗I L 一8 抗體對m C R P s 的m R N A 表達(dá)和蛋白熒光強度未見影響。5 ．不同抗V E G F 抗體濃度與C D 5 5 和C D 5 9 熒光強度呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為r = 一0 ．8 9 6 和r = 一O ．9 8 9 ，p < O ．0 5 。6 ．作用終質(zhì)量濃度O ．1 I ．t g ／r r a 抗V E G F 抗體封閉7 2 h ，調(diào)節(jié)C D 5 9 基