BAFF受體TACI融合蛋白的表達純化與功能研究.pdf

1、B細胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)屬于腫瘤壞死因子超家族的一員。它是外周B細胞存活的重要因子。在動物模型中,BAFF的過表達會導致自身免疫病樣癥狀的發(fā)生。研究發(fā)現,在不同類型的自身免疫性疾病患者的血清中,BAFF的含量是明顯升高的。近期研究還發(fā)現BAFF還與部分腫瘤疾病的發(fā)生有關。因此,BAFF的拮抗劑可能成為治療自身免疫疾病和某些腫瘤的新型藥物。
　　 由于BAFF和受體TACI具有高

2、親和力,可特異性識別BAFF并與之結合,因此體外構建表達的TACI可中和體內過表達的BAFF,抑制B細胞的增殖和活化,緩解和治療與BAFF相關的自身免疫病和B細胞腫瘤。本課題的研究為開發(fā)BAFF拮抗劑治療BAFF相關疾病提供了實驗基礎。
　　 本課題研究方法:對BAFF受體TACI融合蛋白原核表達與純化,在體外研究TACI對B系淋巴瘤細胞增殖的影響,并初步分析了TACI抑制腫瘤細胞系增殖的機理。
　　 主要研究結果:

3、r>　　 (一)TACI融合蛋白原核表達純化:本實驗室已將釣取的TACI基因片段連接到原核表達載體pET-32a上。將重組正確的質粒轉化大腸桿菌Rosetta,獲得TACI表達工程菌。經IPTG誘導,融合蛋白利用鎳金屬螯合瓊脂糖凝膠親和層析柱純化。
　　 (二)TACI抑制B系淋巴瘤細胞系細胞的增殖:某些B系淋巴瘤細胞系表達BAFF及其受體,并且通過自分泌BAFF來促進腫瘤細胞的增殖?？扇苄訲ACI蛋白能夠通過特異性阻斷BAF