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文檔簡介
1、目的:研究基質金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)家族中MMP-9和MMP-2在正常大鼠腦實質觸液核(Cerebrospinal fluid-contactingnucleus,CNS-CN)中的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛刺激條件下的表達變化,探索觸液核與神經(jīng)病理性疼痛的關系及其物質基礎,為神經(jīng)病理性疼痛的治療提供新的思路。
方法:采用可靠的大鼠側腦室注射霍亂毒素亞單位B與辣根過氧化物酶
2、復合物(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)示蹤技術標記觸液核,制作經(jīng)典的坐骨神經(jīng)慢性結扎損傷模型(Chronic constrictioninjury,CCI模型)模擬神經(jīng)病理性疼痛,用yon Frey纖維細絲和熱輻射儀測定大鼠行為學的變化,分別以機械縮足閾值(Mechanical withdrawal threshold,MWT)和熱縮
3、足潛伏期(Thermal withdrawal latency,TWL)對大鼠機械觸誘發(fā)痛和熱痛敏反應進行評分,應用免疫熒光激光共聚焦顯微鏡技術對CB-HRP和MMP-9及MMP-2進行雙標,觀察正常情況下觸液核是否有MMP-9和MMP-2的表達,于術后1d、3d、7d、14d觀察神經(jīng)病理性疼痛條件下觸液核中MMP-9和MMP-2的表達變化。
結果:
1.在正常大鼠CB-HRP標記的觸液核中觀察到少量CB-H
4、RP/MMP-9雙重標記神經(jīng)元,約占觸液核神經(jīng)元的9%;未觀察到CB-HRP/MMP-2雙標神經(jīng)元;
2.神經(jīng)病理性疼痛大鼠,于術后1d至術后14d,機械縮足閾值MWT和經(jīng)元;2.神經(jīng)病理性疼痛大鼠,于術后1d至術后14d,機械縮足閾值MWT和熱縮足潛伏期TWL均明顯降低(P<0.05,vs Sham),術后7d數(shù)值最低(P<0.05,vs Control);大鼠腦片CB-HRP/MMP-9雙標神經(jīng)元計數(shù)在術后3d、7d、
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