雙膦酸鹽藥物與一氧化氮供體治療骨質(zhì)疏松大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OF)是以低骨量及骨組織微結(jié)構(gòu)退變?yōu)樘卣鞯囊环N全身性骨骼疾病，伴有骨脆性增加，易于發(fā)生骨折。骨質(zhì)疏松癥是一種全身性代謝性疾病，是目前世界上發(fā)病率、死亡率及保健費(fèi)用消耗較大的疾病之一。骨質(zhì)疏松癥同許多牙科疾病密切相關(guān)，如牙周病的發(fā)生，發(fā)展及治療；義齒修復(fù)的設(shè)計(jì)與療效；正畸治療；種植義齒修復(fù)等等。特別是目前社會(huì)老齡化進(jìn)程加快、老年骨質(zhì)疏松患者要求種植義齒修復(fù)者增多。骨質(zhì)疏松癥是否引起頜骨改變、不同藥物干

2、預(yù)對(duì)骨重建的影響、如何提高骨質(zhì)疏松患者種植成功率、目前已有的治療骨質(zhì)疏松的藥物及一氧化氮供體能否應(yīng)用于口腔種植系統(tǒng)全身或局部給藥等，是我們關(guān)注的焦點(diǎn)。劉洪臣研究小組已對(duì)此進(jìn)行了一些細(xì)胞水平的基礎(chǔ)研究，取得了一定成果。在此基礎(chǔ)上，本課題以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠為研究對(duì)象，深入探討骨質(zhì)疏松后的骨重建特點(diǎn)、頜骨改變與四肢骨改變的差異、研究篩選一氧化氮供體的有效劑量、比較其與現(xiàn)有藥物治療骨質(zhì)疏松的效果等，為后續(xù)進(jìn)行口腔種植系統(tǒng)全身或局部給藥治療骨質(zhì)疏松和

3、提高骨質(zhì)疏松患者種植成功率的臨床研究建立實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。全文由四部分實(shí)驗(yàn)組成。 實(shí)驗(yàn)一大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立與評(píng)定 目的：建立并評(píng)定大鼠去除雙側(cè)卵巢骨質(zhì)疏松模型。 方法：將96只3月齡SD雌性大鼠分為假手術(shù)對(duì)照(Sham)組24只和卵巢切除骨質(zhì)疏松(OVX)組72只。OVX組切除雙側(cè)卵巢；Sham組切除少許脂肪組織。術(shù)后3月，從兩組分別取8只大鼠，取血后處死。取一側(cè)脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標(biāo)檢測(cè)、M

4、icroCT掃描、骨組織計(jì)量學(xué)測(cè)量及組織病理學(xué)觀察、三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：手術(shù)順利，術(shù)后3月，OVX組大鼠體重比Sham組顯著增長(zhǎng)。ALP、OC較Sham組明顯升高，P＜0.05。骨小梁數(shù)目減少，排列稀疏，骨小梁斷裂；骨小梁面積比和體積比、厚度和數(shù)目，骨礦含量和骨體積密度等均較Sham組顯著降低，骨小梁分離度增加，P＜0.05。OVX組彈性載荷與Sham組升高明顯，P＜0.05；最大應(yīng)力和彈性

5、應(yīng)力顯著降低P＜0.05。 結(jié)論：去勢(shì)手術(shù)簡(jiǎn)便易行、重復(fù)性好。大鼠切除卵巢3月后，體重顯著增加，形成明顯骨質(zhì)疏松狀態(tài)。OVX大鼠，骨量降低，骨小梁結(jié)構(gòu)改變，骨生物力學(xué)性能變差。 實(shí)驗(yàn)二骨質(zhì)疏松大鼠下頜骨與脛骨的對(duì)比研究 目的：比較卵巢切除后3月的骨質(zhì)疏松大鼠下頜骨與脛骨的改變。 方法：去勢(shì)術(shù)后3月，分別從OVX組、Sham組各取大鼠8只。麻醉后脫頸處死。取一側(cè)脛骨、下頜骨，去凈軟組織；MicroCT檢查后

6、；制作脫鈣骨組織切片，行組織病理學(xué)觀察。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：大鼠去除雙側(cè)卵巢3月后，下頜骨經(jīng)MicroCT掃描：骨組織體積比、骨小梁厚度和單位體積骨小梁數(shù)目，均比Sham組升高，骨小梁分離度較Sham組降低，P＜0.05。與脛骨改變比較，結(jié)果完全相反。另外，大鼠下頜骨的三維骨礦含量和骨體積密度也升高，P＜0.05。骨組織切片病理學(xué)觀察：脛骨松質(zhì)骨呈條索狀，骨小梁相互連接成網(wǎng)；下頜骨松質(zhì)骨較致密，呈板狀。O

7、VX組比Sham組，磨牙下方松質(zhì)骨骨髓腔增大，牙槽突新生骨基質(zhì)減少。 結(jié)論：大鼠脛骨和下頜骨的松質(zhì)骨形態(tài)、結(jié)構(gòu)表現(xiàn)不一；去除雙側(cè)卵巢3月后，脛骨、下頜骨改變差異很大：脛骨呈現(xiàn)明顯骨質(zhì)疏松狀態(tài)；下頜骨骨量增加，結(jié)構(gòu)致密。需進(jìn)行更深入全面的研究。 實(shí)驗(yàn)三左旋精氨酸治療骨質(zhì)疏松大鼠的實(shí)驗(yàn)研究 目的：實(shí)驗(yàn)研究不同劑量L-Arg治療骨質(zhì)疏松大鼠的效果，篩選有效劑量。 方法：將32只OVX大鼠，8只Sham大鼠，分成

8、Sham組、OVX組、OVX給藥組。給予不同劑量L-Arg：5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg，Sham組和OVX對(duì)照組皮下注射生理鹽水。藥物治療4周，麻醉后取血，脫頸處死。取脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標(biāo)檢測(cè)、MicroCT掃描、骨組織計(jì)量學(xué)測(cè)量及組織病理學(xué)觀察、三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： L-Arg10mg/kg組各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果接近或好于Sham組，多數(shù)結(jié)果無(wú)顯著性差異

9、。L-Arg5mg/kg組各項(xiàng)指標(biāo)稍遜于L-Arg10mg/kg組，其最大應(yīng)力與OVX組比無(wú)差異，與Sham組比差異顯著，P＜0.05，骨小梁連接成網(wǎng)，但骨小梁裂隙較多見。L-Arg20mg/kg組，多數(shù)檢測(cè)指標(biāo)比OVX組顯著差。 結(jié)論：三種不同劑量L-Arg治療骨質(zhì)疏松大鼠，療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。L-Arg10mg/kg組療效最好，L-Arg5mg/kg組療效次之，但骨的生物力學(xué)性能恢復(fù)稍差；L-Arg20mg/kg組療效最差

10、，比OVX組骨質(zhì)疏松狀態(tài)更加惡化。 實(shí)驗(yàn)四阿侖膦酸鈉與左旋精氨酸治療骨質(zhì)疏松大鼠的實(shí)驗(yàn)研究 目的：實(shí)驗(yàn)研究Alendronate與L-Arginine治療骨質(zhì)疏松大鼠的效果，初步探討藥物作用機(jī)理。 方法：將32只OVX大鼠，8只Sham大鼠，分成Sham組、OVX組、OVX給藥組。給予不同藥物：ALN、L-Arg、Alen+L-Arg，治療4周。Sham組和OVX組皮下注射生理鹽水。藥物治療4周，麻醉后取血，脫頸

11、處死。取脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標(biāo)檢測(cè)、MicroCT掃描、骨組織計(jì)量學(xué)測(cè)量及組織病理學(xué)觀察、三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：?jiǎn)为?dú)用藥ALN或L-Arg，各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果接近或好于Sham組。ALN組最大應(yīng)力、彈性應(yīng)力顯著性高于OVX組，與Sham組比無(wú)顯著性差異，L-Arg組最大應(yīng)力、彈性應(yīng)力與Sham、ALN組比均無(wú)顯著性差異。Alen+L-Arg組生物力學(xué)指標(biāo)與Sham組比無(wú)顯著性