雙膦酸鹽藥物與一氧化氮供體治療骨質疏松大鼠的實驗研究.pdf

1、骨質疏松癥(Osteoporosis，OF)是以低骨量及骨組織微結構退變?yōu)樘卣鞯囊环N全身性骨骼疾病，伴有骨脆性增加，易于發(fā)生骨折。骨質疏松癥是一種全身性代謝性疾病，是目前世界上發(fā)病率、死亡率及保健費用消耗較大的疾病之一。骨質疏松癥同許多牙科疾病密切相關，如牙周病的發(fā)生，發(fā)展及治療；義齒修復的設計與療效；正畸治療；種植義齒修復等等。特別是目前社會老齡化進程加快、老年骨質疏松患者要求種植義齒修復者增多。骨質疏松癥是否引起頜骨改變、不同藥物干

2、預對骨重建的影響、如何提高骨質疏松患者種植成功率、目前已有的治療骨質疏松的藥物及一氧化氮供體能否應用于口腔種植系統(tǒng)全身或局部給藥等，是我們關注的焦點。劉洪臣研究小組已對此進行了一些細胞水平的基礎研究，取得了一定成果。在此基礎上，本課題以實驗動物大鼠為研究對象，深入探討骨質疏松后的骨重建特點、頜骨改變與四肢骨改變的差異、研究篩選一氧化氮供體的有效劑量、比較其與現有藥物治療骨質疏松的效果等，為后續(xù)進行口腔種植系統(tǒng)全身或局部給藥治療骨質疏松和

3、提高骨質疏松患者種植成功率的臨床研究建立實驗基礎。全文由四部分實驗組成。 實驗一大鼠骨質疏松模型的建立與評定 目的：建立并評定大鼠去除雙側卵巢骨質疏松模型。 方法：將96只3月齡SD雌性大鼠分為假手術對照(Sham)組24只和卵巢切除骨質疏松(OVX)組72只。OVX組切除雙側卵巢；Sham組切除少許脂肪組織。術后3月，從兩組分別取8只大鼠，取血后處死。取一側脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標檢測、M

4、icroCT掃描、骨組織計量學測量及組織病理學觀察、三點彎曲試驗。所得數據經SPSS13.0統(tǒng)計分析。 結果：手術順利，術后3月，OVX組大鼠體重比Sham組顯著增長。ALP、OC較Sham組明顯升高，P＜0.05。骨小梁數目減少，排列稀疏，骨小梁斷裂；骨小梁面積比和體積比、厚度和數目，骨礦含量和骨體積密度等均較Sham組顯著降低，骨小梁分離度增加，P＜0.05。OVX組彈性載荷與Sham組升高明顯，P＜0.05；最大應力和彈性

5、應力顯著降低P＜0.05。 結論：去勢手術簡便易行、重復性好。大鼠切除卵巢3月后，體重顯著增加，形成明顯骨質疏松狀態(tài)。OVX大鼠，骨量降低，骨小梁結構改變，骨生物力學性能變差。 實驗二骨質疏松大鼠下頜骨與脛骨的對比研究 目的：比較卵巢切除后3月的骨質疏松大鼠下頜骨與脛骨的改變。 方法：去勢術后3月，分別從OVX組、Sham組各取大鼠8只。麻醉后脫頸處死。取一側脛骨、下頜骨，去凈軟組織；MicroCT檢查后

6、；制作脫鈣骨組織切片，行組織病理學觀察。所得數據經SPSS13.0統(tǒng)計分析。 結果：大鼠去除雙側卵巢3月后，下頜骨經MicroCT掃描：骨組織體積比、骨小梁厚度和單位體積骨小梁數目，均比Sham組升高，骨小梁分離度較Sham組降低，P＜0.05。與脛骨改變比較，結果完全相反。另外，大鼠下頜骨的三維骨礦含量和骨體積密度也升高，P＜0.05。骨組織切片病理學觀察：脛骨松質骨呈條索狀，骨小梁相互連接成網；下頜骨松質骨較致密，呈板狀。O

7、VX組比Sham組，磨牙下方松質骨骨髓腔增大，牙槽突新生骨基質減少。 結論：大鼠脛骨和下頜骨的松質骨形態(tài)、結構表現不一；去除雙側卵巢3月后，脛骨、下頜骨改變差異很大：脛骨呈現明顯骨質疏松狀態(tài)；下頜骨骨量增加，結構致密。需進行更深入全面的研究。 實驗三左旋精氨酸治療骨質疏松大鼠的實驗研究 目的：實驗研究不同劑量L-Arg治療骨質疏松大鼠的效果，篩選有效劑量。 方法：將32只OVX大鼠，8只Sham大鼠，分成

8、Sham組、OVX組、OVX給藥組。給予不同劑量L-Arg：5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg，Sham組和OVX對照組皮下注射生理鹽水。藥物治療4周，麻醉后取血，脫頸處死。取脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標檢測、MicroCT掃描、骨組織計量學測量及組織病理學觀察、三點彎曲試驗。所得數據經SPSS13.0統(tǒng)計分析。 結果： L-Arg10mg/kg組各項檢測結果接近或好于Sham組，多數結果無顯著性差異

9、。L-Arg5mg/kg組各項指標稍遜于L-Arg10mg/kg組，其最大應力與OVX組比無差異，與Sham組比差異顯著，P＜0.05，骨小梁連接成網，但骨小梁裂隙較多見。L-Arg20mg/kg組，多數檢測指標比OVX組顯著差。 結論：三種不同劑量L-Arg治療骨質疏松大鼠，療效差異有統(tǒng)計學意義。L-Arg10mg/kg組療效最好，L-Arg5mg/kg組療效次之，但骨的生物力學性能恢復稍差；L-Arg20mg/kg組療效最差

10、，比OVX組骨質疏松狀態(tài)更加惡化。 實驗四阿侖膦酸鈉與左旋精氨酸治療骨質疏松大鼠的實驗研究 目的：實驗研究Alendronate與L-Arginine治療骨質疏松大鼠的效果，初步探討藥物作用機理。 方法：將32只OVX大鼠，8只Sham大鼠，分成Sham組、OVX組、OVX給藥組。給予不同藥物：ALN、L-Arg、Alen+L-Arg，治療4周。Sham組和OVX組皮下注射生理鹽水。藥物治療4周，麻醉后取血，脫頸

11、處死。取脛骨、股骨，去凈軟組織。分別行血生化骨代謝指標檢測、MicroCT掃描、骨組織計量學測量及組織病理學觀察、三點彎曲試驗。所得數據經SPSS13.0統(tǒng)計分析。 結果：單獨用藥ALN或L-Arg，各項檢測結果接近或好于Sham組。ALN組最大應力、彈性應力顯著性高于OVX組，與Sham組比無顯著性差異，L-Arg組最大應力、彈性應力與Sham、ALN組比均無顯著性差異。Alen+L-Arg組生物力學指標與Sham組比無顯著性